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目的
建立柯萨奇病毒A组6 （Coxsackievirus A6,CVA6）和10型（CVA10）的SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法并进行评价及初步应用。
方法根据GenBank上的CVA6和CVA10序列，分别设计特异性引物，建立SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法体系，并分别进行灵敏度，重复性和特异性检测，然后利用该方法对649份2014年天津市未明确分型的肠道病毒阳性标本进行检测。
结果成功建立CVA6和CVA10的SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法及定量标准曲线，其检出限均为101 copies/μL，重复性实验的变异系数均小于2%。该方法特异性强，与柯萨奇病毒（A组2、4、5、16型）、肠道病毒EV71型、诺如病毒、轮状病毒、麻疹病毒和乙型流感病毒均无交叉反应。利用该方法检测649份未分型标本，发现136份为CVA6阳性和174份为CVA10阳性，分别占未分型阳性标本的20.96%和26. 81%。
结论本研究建立的检测CVA6和CVA10荧光定量RT-PCR方法灵敏度高、重复性好、特异性强，应用于2014年天津市手足口病监测，发现CVA6和CVA10已成为优势型病原体。