【摘 要】
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目的探讨乏氧对不同类型肺癌细胞乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、乏氧诱导因子-2α(HIF-2α)和乏氧诱导因子-β(HIF-β)基因表达的影响及其相关性。方法以0.5低氧培养箱模拟细胞
【机 构】
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山东省肿瘤防治研究院基础研究中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(3057054)
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目的探讨乏氧对不同类型肺癌细胞乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、乏氧诱导因子-2α(HIF-2α)和乏氧诱导因子-β(HIF-β)基因表达的影响及其相关性。方法以0.5低氧培养箱模拟细胞低氧环境,采用定量RT-PCR和Western blotting方法分别检测乏氧处理4～24h人肺癌细胞系SPCA1、A549、H446、SH77、H520和95D中HIF-1α、HIF-2α和HIF-βmRNA和蛋白水平的表达。结果1.常氧下不同肺癌细胞系HIF-1α、HIF-2αmRNA表达水平较低,短期乏氧HIF-1αmRNA降低而HIF-2αmRNA增加,随乏氧时间延长两者mRNA表达逐渐增加。2.HIF-1α和HIF-2α蛋白在常氧下表达均较低,乏氧下两者表达增强但变化趋势不一致,HIF-1α蛋白在所有细胞中均有表达,HIF-2α蛋白仅在某些细胞有表达。3.HIF-βmRNA和蛋白在常氧或乏氧下表达无明显变化。4.相关性分析表明,乏氧下HIF-2αmRNA与蛋白表达呈正相关(r=0.989,P=0.011);而HIF-1α和HIF-βmRNA与蛋白无相关性。结论肺癌细胞中HIF-1α、HIF-2α和HIF-β对乏氧刺激表现出不同的应答方式且具有细胞特异性,乏氧对HIF-1α和HIF-2α的调控可能分别发生在翻译和转录水平,而对HIF-β无明显的调控作用。
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