论文部分内容阅读
将粪产碱杆菌青霉素G酰化酶基因构建重组表达质粒pKKFPGA,pKKFPGA再转化宿主菌DH5α,所得重组菌不需诱导便能高效表达青霉素G酰化酶,表达量达2590u/L,比野生型粪产碱杆菌表达量高432倍,其菌体比活力达300(u/L)/A600.菌体破碎后的上清液经DEAE-Sepharose CL 6B离子交换层析和Butyl-Sepharose CL 4B疏水层析,即可得纯度提高20倍、比活为68.6u/mg的青霉素G酰化酶,两步纯化的总收率达91%.Western印迹分析表明5%的原前体青霉素酰化酶