逆转录病毒介导hBMP7基因转染兔骨髓间充质干细胞的表达

来源 :解放军医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hubaonian

【摘要】

：

采用粘-粘端连接方法构建hBMP7逆转录病毒载体,重组质粒转染包装细胞PT67后,制备含目的基因的重组逆转录病毒液感染兔骨髓间充质干细胞.限制性内切酶酶切分析筛选插入方向正

【作者】

：

金丹曾位森裴国献胡罢生魏宽海王珂陈滨

【机构】

：

510515

【出处】

：

解放军医学杂志

【发表日期】

：

2002年6期

【关键词】

：

逆转录病毒 hBMP7基因转染兔骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白质类生物医学工程基因表达 bone marrow stem cell bone mor

【基金项目】

：

国家重点基础研究发展计划(973计划)，军队医学科研项目

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采用粘-粘端连接方法构建hBMP7逆转录病毒载体,重组质粒转染包装细胞PT67后,制备含目的基因的重组逆转录病毒液感染兔骨髓间充质干细胞.限制性内切酶酶切分析筛选插入方向正确的重组质粒并进行基因测序.结果显示,hBMP7逆转录病毒载体中外源基因插入方向正确、无碱基错误和缺失.原位杂交和免疫组织化学检测表明,感染后2天经基因转染的BMSc原位杂交和免疫组化检测结果呈阳性,未经转染的细胞检测结果呈阴性.转染的BMSc经G418筛选至4周仍有外源BMP蛋白的表达.提示采用逆转录病毒介导方法转染的BMSc中可有外

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