【摘 要】
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目的肿瘤是因细胞增殖、凋亡等调控机制异常而引起的疾病,目前依然严重危害着人类健康。文中主要探究中草药初提物诱导肺癌细胞凋亡和抑制增殖的作用。方法以肺癌细胞A549为
【机 构】
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上海大学生命科学学院李秋萍理学硕士研究生,西安交通大学苏州研究生院,中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所,东南大学生物科学与医学工程学院
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目的肿瘤是因细胞增殖、凋亡等调控机制异常而引起的疾病,目前依然严重危害着人类健康。文中主要探究中草药初提物诱导肺癌细胞凋亡和抑制增殖的作用。方法以肺癌细胞A549为对象,实验设空白对照(0 ng/m L)、中草药初提物设不同剂量(170、340、680 ng/m L)组,培养箱中24、48 h培养。采用CCK8法和LDH法检测中草药初提物对肺癌细胞的生长抑制作用;利用荧光显微镜、流式细胞仪检测细胞调亡;以实时定量PCR和蛋白免疫印迹法检测中草药初提物对h TERT mRNA、Cleaved caspase-3和Cleaved PARP蛋白的相对表达量。结果随着初提物浓度(170、340、680 ng/m L)和处理时间(24、48 h)的增加,A549细胞存活率也随之降低,损伤率提高(P<0.05),IC50为510 ng/m L。空白对照(未用药处理)无DNA损伤的细胞表现为一圆形荧光细胞核,680 ng/m L A549细胞DNA呈典型的凋亡彗星尾形状。680 ng/m L初提物作用后A549尾部DNA含量较空白对照增加(P<0.01)。流式细胞分析仪检测表明,随着初提物浓度的升高和处理时间的延长,A549细胞凋亡率逐步升高。340 ng/m L提取物处理A549细胞24 h后h TERT mRNA表达量较0 h下调[0.25(0.23~0.28)vs 1.00(0.91~1.09)],差异有统计学意义(P<0.01)。随初提物浓度增加,A549 Cleaved caspase3和Cleaved PARP表达量增多。结论初提物通过下调h TERT mRNA表达,促进Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白的表达来诱导细胞凋亡。
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