基于易错PCR技术的α-淀粉酶基因的定向进化研究

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采用基因体外定向进化策略中易错PCR技术,用碱基类似物5-溴脱氧尿苷三磷酸(5-BrdUTP)部分取代脱氧胸苷三磷酸(dTTP),对野油菜黄单胞菌的α-淀粉酶基因进行了体外诱变。通过鉴别培养基进行筛选,得到5个具有高酶活的诱变基因,利用生物学软件DNAstar和出发基因序列进行比较,分析了突变位点和酶功能变化的相应关系。结果显示:基因诱变后酶活的改变主要是由淀粉酶基因空间结构的改变而引起的,而不是由启动予的变化引起的。
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