【摘 要】
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目的 探讨洗心汤治疗阿尔茨海默病(AD)的可能作用机制.方法 60只SPF级SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐组、洗心汤组、益生菌组,每组12只.除假手术组外其余各组
【机 构】
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陕西中医药大学第一临床学院,陕西省咸阳市西咸新区西咸大道,712046;陕西中医药大学
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目的 探讨洗心汤治疗阿尔茨海默病(AD)的可能作用机制.方法 60只SPF级SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐组、洗心汤组、益生菌组,每组12只.除假手术组外其余各组大鼠采取D-半乳糖腹腔注射和双侧脑室注射β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)建立AD大鼠模型.造模第5周开始,假手术组及模型组以生理盐水2ml/d灌胃,多奈哌齐组(0.88mg/kg·d)、洗心汤组(0.94g/kg·d)、益生菌组(30.85 mg/kg·d)以相应药物每天灌胃1次.干预4周后,采用Morris水迷宫实验观测各组大鼠空间学习记忆能力;HE染色观察海马CA1区病理学改变;免疫组化法检测海马区β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)表达情况;蛋白免疫印迹法检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)、络氨酸激酶受体B(TrkB)及结肠BDNF蛋白表达;16S rRNA检测各组大鼠肠道菌群多样性和优势物种分布情况.结果 与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长,60s内总游泳路程、目标平台象限滞留时间和有效区域进入次数都显著缩短,海马区Aβ1-42蛋白表达降低,海马组织中BDNF、TrkB及结肠组织BDNF蛋白表达亦降低(P<0.05或P<0.01),HE染色显示大鼠海马CA1区神经细胞排列紊乱、松散,胞体萎缩,胞膜溶解,核固缩、深染,正常神经细胞明显减少.与模型组比较,洗心汤组上述各指标及海马病理损伤均明显改善(P<0.05或P<0.01).16S rRNA结果显示,各组大鼠肠道菌群门水平均以拟杆菌门、厚壁菌门和变形菌门为优势类群.与模型组比较,多奈哌齐组、洗心汤组及益生菌组的分类单元(OTU)数量显著增加,益生菌组的厚壁菌门和酸杆菌门明显增加,多奈哌齐组的糖念珠菌门明显增加(P<0.05或P<0.01),而洗心汤组与模型组差异无统计学意义(P>0.05).结论 洗心汤可以改善AD大鼠的空间学习记忆能力、减少海马区Aβ1-42沉积,其作用机制可能与提高脑肠区神经营养因子相关蛋白和调节肠道微生态有关.
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