猪繁殖与呼吸综合征病毒XH株感染性克隆的构建

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为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)反向遗传操作系统.本实验采用RT-PCR方法将PRRSV-XH株的基因组序列分为6个片段进行扩增,连接至低拷贝载体pOKQ中,获得全长cDNA克隆.将该克隆体外转录,经脂质体转染Marc-145细胞,观察细胞病变.经RT-PCR、间接免疫荧光和western blot等试验验证,表明构建了具有感染性的PRRSV-XH株全长cDNA克隆.本实验为在分子水平上研究PRRSV的复制、致病机理和基因产物的功能等方面提供技术支持,并为构建新型病毒载体和开发安全有效的活病毒疫苗奠定基础.
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