【目的】基于网络药理学和试验验证探究苦豆子的抗炎作用机制。【方法】依托HERB数据库筛选苦豆子有效成分并利用SIB在线工具检索相应靶点,利用Cytoscape 3.6.1软件构建有效成分-靶点网络图;结合NCBI、GeneCards、OMIM等数据库检索苦豆子抗炎相关靶点,上传至STRING平台,构建蛋白-蛋白互作（PPI）网络图;利用DAVID数据库对关键靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析;选择PPI中度值最高的靶点与关键药效成分进行分子对接;通过体外试验检测苦豆子关键活性成分（槐定碱、苦参碱）对小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞毒性,以及对脂多糖（LPS）刺激RAW264.7细胞后一氧化氮（NO）相对产生量的影响。【结果】苦豆子中主要含有槐定碱、苦参碱、金雀花碱、槐胺碱、槐果碱等10种有效成分,可作用于核因子κB激酶亚基β抑制因子（IKBKB）、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14）和基质金属蛋白酶2（MMP2）等55个关键抗炎靶点。GO功能富集分析得到121个GO条目（P＜0.01）,其中与生物过程相关的条目61个,包括信号转导、蛋白质磷酸化、对药物的反应、炎症反应等;与分子功能相关的条目37个,包括蛋白质结合、蛋白激酶活性、酶结合等;与细胞组分相关的条目23个,包括质膜、胞浆、细胞表面、大分子复合物等;涉及KEGG信号通路104条,可通过调节磷脂酰激醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）、促分裂素原活化蛋白激酶（MAPK）、核因子κB（NF-κB）、肿瘤坏死因子（TNF）、趋化因子等信号通路发挥抗炎作用。分子对接结果显示,槐定碱与热休克蛋白HSP90α（HSP90AA1）靶点、苦参碱与组蛋白去乙酰化酶11（HDAC11）靶点紧密结合。细胞毒性试验结果显示,0.02～1.28 mg/mL的槐定碱和苦参碱对RAW264.7细胞无毒副作用。炎症细胞模型试验结果显示,槐定碱和苦参碱可抑制由LPS刺激的RAW264.7细胞中NO的产生。【结论】苦豆子可能通过槐定碱、苦参碱等活性成分作用于IKBKB、NLRP3、MAPK14和MMP2等关键靶标,调控PI3K-Akt、MAPK、NF-κB、TNF等信号通路发挥抗炎作用,这为进一步深入阐明苦豆子的抗炎作用机制提供依据。