【摘 要】
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为了制备猪源pIgR蛋白的多克隆抗体,分析NCBI提供的猪源pIgR的胞外区基因序列并设计引物,经过PCR、酶切、连接,将目的 序列克隆入原核表达载体pET-30a(+),测序验证成功后,将带有目的 片段的重组质粒转化入大肠杆菌(E.coli) BL21 (DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,通过Ni-NTA亲和层析的方法获得了较为纯净的pIgR蛋白.用纯化后的pIgR与佐剂混合后免疫日本大白耳兔,制备兔源的多克隆抗体.结果 显示,本研究正确构建了带有pIgR基因的重组质粒,并成功表达pIgR蛋白,预
【机 构】
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新疆农业大学动物医学学院,新疆乌鲁木齐830052;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州 730046;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,
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为了制备猪源pIgR蛋白的多克隆抗体,分析NCBI提供的猪源pIgR的胞外区基因序列并设计引物,经过PCR、酶切、连接,将目的 序列克隆入原核表达载体pET-30a(+),测序验证成功后,将带有目的 片段的重组质粒转化入大肠杆菌(E.coli) BL21 (DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,通过Ni-NTA亲和层析的方法获得了较为纯净的pIgR蛋白.用纯化后的pIgR与佐剂混合后免疫日本大白耳兔,制备兔源的多克隆抗体.结果 显示,本研究正确构建了带有pIgR基因的重组质粒,并成功表达pIgR蛋白,预测的分子质量约为82 ku;ELISA测定结果显示,pIgR蛋白免疫日本大白耳兔获得的多克隆抗体效价高,且在稀释至1∶3200时依然具有良好的反应性;Western-blot和IFA检测结果显示,制备的pIgR多克隆抗体特异性高、敏感性好.结果 表明,本次研究为后续深入探索猪机体黏膜免疫过程中pIgR相关的分子机制奠定了基础,为后期制备猪源pIgR的单克隆抗体提供了前期的物质准备.
其他文献
随着社会的发展，食品的种类随市场需求增加，食品的安全问题也随之越来越突出。其中，与食品安全关联因素最大的莫过于食品添加剂。因其对食品的品质、味道等方面都有改善作用，应用较为广泛，所以已成为食品安全领域重点关注的要素之一。食品添加剂的错误使用会对人的身体健康造成不良影响，不利于食品产业的可持续发展。基于此，本文从食品添加剂和食品安全入手，对其相关内容进行概述，举例说明食品添加剂的正反影响以及目前存在的问题，最后提出控制食品添加剂的安全措施。
1 引言rn三德范村的村域面积达14 km2,村域范围内东西相距最大达5 km,南北相距最大达4 km,常住人口数多达6000人.村民姓氏众多,以王、张、冯、单等二十多个姓氏为主.该村现属山东省济南市章丘区,章丘古称阳丘,于隋朝开皇十六年间改为现称.历史上村庄名也几经更迭,经历史文物考证,清道光年间确立“三德范”的名称并沿用至今.该村地处章莱古道必经之地,古道穿村而过形成历史上极其繁荣的中心大街(图1).三德范村因其历史久远、民居建筑极具当地特色、文化遗留丰富,再加上其独特的地理环境,被列为山东省级历史文
目的 分析疾控中心针对慢性病患者展开健康教育对其健康知识掌握情况的影响.方法 纳入2020年1-12月山东聊城莘县疾病预防控制中心接收并管辖的慢性病患者90例为本次研究样本,以抽签法分为对照组和观察组各45例,对照组采用常规宣传,观察组采用健康教育,两组均接受为期3个月的宣传并跟踪随访患者生活和疾病情况,组织患者接受问卷调查,比较两组患者健康知识掌握评分以及生活中不良行为发生率.结果 观察组患者健康知识掌握评分均高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).观察组患者吸烟、饮酒、摄入肥肉、盐摄入量超标、
目的:探讨针对老年心房颤动伴随不稳定型心绞痛情况采用联合治疗方案(达比加群酯+替格瑞洛)的疗效情况.方法:76例老年心房颤动以及伴有不稳定型心绞痛的患者均是本院心内科在2019年3月至2021年3月接收的且符合研究内容的患者,将受试者进行随机分组,各38例,对照组患者口服华法林钠片联合替格瑞洛治疗,研究组患者口服替格瑞洛联合达比加群酯治疗,检测两组治疗前后的各项凝血指标数据变化、统计患者发生出血的情况以及发生不良心血管事件的概率.结果:治疗前两组的各凝血指标水平验证不具备统计性(P>0.05),治疗3个月
通过对不同地区传统乡村——党家村、西递村“窄院”与“天井”住宅的地理,气候条件和朝向、采光、通风等三个方面生态优点的研究总结,运用相关软件,模拟测试各自的热环境舒适性,初步对这两类“窄院”与“天井”住宅的气候适应性做了定性和定量比较,得出其应对地域气候差异所蕴含的气候适应性差别和共同热环境舒适性目标.
为了解不同养殖模式下牛源大肠杆菌对抗菌药物的耐药性及CTX-M型基因流行分布特征,本研究从甘肃和新疆采集肉牛、奶牛和牦牛粪便样品,经分离鉴定得到220株大肠杆菌,采用纸片扩散法(K-B法)对分离株进行药物敏感性测定,通过PCR法检测CTX-M型基因和整合子基因型,利用多重PCR法对CTX-M阳性菌株进行种族进化关系分析.结果显示,肉牛源分离株主要对4类抗菌药物产生耐药,耐药率为17.98％;奶牛源分离株主要对5类抗菌药物产生耐药,耐药率为22.39％;牦牛源分离株主要对3类抗菌药物产生耐药,耐药率为14.
目的:观察放血疗法联合激素冲击治疗肝火旺盛型鹘眼凝睛病的临床疗效.方法:选取本院2018年7月至2021年7月收治的80例肝火旺盛型鹘眼凝睛患者为研究对象,将受试者进行随机分组,各40例,对照组患者接受糖皮质激素冲击治疗,研究组患者在对照组的基础上加用耳尖、肝阳点放血治疗,治疗12周后比较两组患者的治疗总有效率以及临床活动度评分、双眼眼球突出度、中医证候积分、NOSPECS病情分级变化.结果:研究组患者治疗总有效率相比与对照组更高(95.00％vs 77.50％),两组比较存在统计学差异(P0.05),治
目的 探讨新型口服抗凝药利伐沙班对非瓣膜性房颤脑梗死患者Xa因子活性及血清炎性因子水平的影响.方法 本研究选取2017年10月—2019年10月天津市环湖医院收治的非瓣膜性房颤脑梗死患者100例,随机分为对照组和研究组各50例.在常规治疗基础上,对照组给予华法林抗凝治疗,研究组给予利伐沙班抗凝治疗,两组均随访1年.于随访3个月和1年时检测凝血功能、Xa因子活性、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 治疗后3个月、1年,研究组APTT、PT和INR均低于对照组,差异均有统计学
目的:探讨早期护理干预对下呼吸道感染性疾病患者焦虑的影响.方法:将本院80例下呼吸道感染性疾病患者,数字表随机法分二组.对照组给予常规护理,研究组实施早期护理干预.比较两组护理前后焦虑自评量表评分值、汉密尔顿焦虑量表评分值、护理满意程度、下呼吸道感染性疾病病原菌转阴的时间、入院首日至出院时间、并发症的出现率.结果:研究组焦虑自评量表评分值、汉密尔顿焦虑量表评分值低于对照组,护理满意程度高于对照组,下呼吸道感染性疾病病原菌转阴的时间、入院首日至出院时间短于对照组,并发症的出现率低于对照组,存在显著差异,P<
目的:探讨糖尿病住院病患肺部感染的影响因素及护理措施.方法:将本院80例糖尿病住院肺部感染病患,数字表随机法分成两组.对照组给予常规护理,研究组实施综合护理干预.比较两组护理前后血糖生化、生存质量评分、护理满意程度、肺部感染消失时间、住院的时间、并发症发生率.结果:研究组血糖生化低于对照组,生存质量评分高于对照组,护理满意程度高于对照组,肺部感染消失时间、住院的时间短于对照组,并发症发生率低于对照组,存在显著差异,P<0.05.结论:糖尿病住院肺部感染病患实施综合护理干预效果确切,可有效改善病患的病情,并