乙型肝炎患者外周血病毒特异性CD8阳性细胞毒性T淋巴细胞的数量和功能分析

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目的分析急性乙型肝炎(AHB)和慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的数量及功能。方法 36例HLA-A2阳性的乙型肝炎患者,其中AHB12例,CHB24例。分别用含HBV抗原C、S和P区的c18-27、s183-191和p575-583三个肽段的四聚体[Tetramer(Tc18-27、Ts183-191、Tp575-583)]检测患者外周血单核淋巴细胞(PBMCs)中HBV特异性CD8阳性CTL细胞的数量,同时用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测其分泌IFN-γ的功能。用SPSS13.0进行统计学分析。结果 AHB和CHB患者外周血中Tc18-27特异性的CTL数量无明显不同;而Ts183-191特异性CTL的平均值分别为0.24%±0.39%和0.03%±0.02%,阳性率分别为75%和33.3%;Tp575-583特异性CTL平均值分别为0.08%±0.09%和0.02%±0.01%,阳性率分别为50%和16.7%,AHB较CHB显著升高(P<0.05)。此外,AHB患者平均Tetramer阳性的个数为1.58个,而CHB患者平均为0.67个,AHB较CHB显著增多(P<0.01)。在9例AHB患者中,其外周血Ts183-191特异性的CTL细胞的数量为139~21735个/106PBMCs,用ELISPOT方法检测相对应的分泌IFN-γ的斑点形成细胞(SFC)为0~252个/106PBMCs,AHB患者Tetramer细胞数和ELISPOT检测的IFN-γ斑点数有明显相关性(P<0.01),而CHB患者则无此相关性。结论 AHB与CHB患者外周血中HBV特异性CTL的数量和分泌IFN-γ的差异提示CTL可能在清除病毒方面发挥着至关重要的作用,是今后慢性乙型肝炎免疫治疗的重要研究方向之一。
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