结核分枝杆菌Dnak和MPT83蛋白的抗原性评价

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yan4321
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

对两种结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)蛋白Dnak(Rv0350)和MPT83(Rv2873)进行抗原性评价,为结核病免疫诊断和疫苗研究提供实验依据。

方法

通过基因重组和蛋白质纯化技术,克隆表达和纯化结核分枝杆菌蛋白Dnak(Rv0350)和MPT83(Rv2873)。收集人群包括结核病患者、非结核病其他肺部疾病患者和健康志愿者的血液标本,以基因重组Dnak(Rv0350)和MPT83(Rv2873)蛋白作抗原,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和效应T细胞酶联免疫斑点试验(ELISPOT)分别进行人群体液和细胞免疫学检测,分析其免疫学性能。

结果

成功获得基因重组表达和纯化的结核分枝杆菌蛋白Dnak(Rv0350)和MPT83(Rv2873),以这两种蛋白质作抗原进行人群体液和细胞免疫学检测。体液免疫检测,用ELISA检测135名结核病患者、56名非结核病其他肺部疾病患者和94名健康人的血清特异性IgG抗体,结果显示,Dnak(Rv0350)检测的灵敏度、特异度和准确率分别为77.80%(105/135)、56.70%(85/150)和66.67%(190/285);MPT83(Rv2873)检测的灵敏度、特异度和准确率分别为76.30%(103/135)、43.30%(65/150)和58.95%(168/285)。细胞免疫检测,用ELISPOT检测59名结核病患者、65名非结核病其他肺部疾病患者和64名健康志愿者的外周血单核细胞被抗原刺激后效应T淋巴细胞产生γ干扰素(IFN-γ)的水平,结果显示,Dnak(Rv0350)检测的灵敏度、特异度和准确率分别为66.10%(39/59)、62.79%(81/129)和63.83%(120/188);MPT83(Rv2873)检测的灵敏度、特异度和准确率分别为47.46%(28/59)、79.84%(103/129)和69.68%(131/188)。

结论

结核分枝杆菌Dnak(Rv0350)和MPT83(Rv2873)蛋白均具有较好的抗原性,并且刺激T细胞产生免疫应答的能力较强,两者联合可能对于结核病免疫诊断和新型抗结核疫苗研究有更好的应用价值。

其他文献
目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿维持治疗期间照顾者负担的影响因素。方法采用便利抽样法,选取2015年10月—2016年10月在首都医科大学附属北京儿童医院就诊的86名ALL患儿维持期照顾者为研究对象。采用一般资料调查表、照顾者负担问卷(CBI)对其进行调查。共发放问卷86份,回收有效问卷80份。结果80名维持治疗期间ALL患儿主要照顾者的CBI总分为(47.22±13.71)分,得分范围1
目的调查我国西部地区医疗机构中老年病房及护士配置现状,为进一步规划老年病房建设提供参考。方法采用方便抽样法,选取2018年2—3月我国西部地区的11个省、自治区、直辖市不同级别医疗机构中的护理管理者为研究对象。采取自行设计的《老年病房建设一般情况调查表》对其进行横断面调查。结果共收集问卷327份,有效问卷289份,有效率为88.38%。调查的289家医疗机构中142家(49.1%)设置老年病房。1
目的对乳腺癌化疗所致脱发压力量表(CADS)进行汉化,并验证其信效度。方法应用比利斯林跨文化翻译原则对CADS量表进行汉化调适,采用便利抽样的方法,选取2016年1月—2017年12月在郑州大学附属肿瘤医院(河南省肿瘤医院)住院化疗的190例乳腺癌患者为研究对象,应用CADS量表、焦虑自评量表(SAS)对患者实施调查,分析中文版CADS量表的信效度。共回收有效问卷171份。结果中文版CADS量表保
目的对中国东部温州地区淋病奈瑟菌流行菌株进行分型,并对四环素耐药的相关机制进行研究。方法从淋病患者中分离出77株淋病奈瑟菌,采用E-test法进行青霉素、四环素、环丙沙星、大观霉素、头孢曲松和阿奇霉素的最小抑菌浓度(MIC)测定。PCR和DNA测序用于检测四环素抗性相关基因,包括Tet-M基因、mtrR启动子区和mtrR编码区。多抗原序列分型(NG-MAST)和多位点序列分型(MLST)分别用于确
期刊
目的观察CD226基因敲除(KO)对高脂饲养的肥胖小鼠相关指标的影响,分析CD226KO肥胖小鼠脾脏各主要免疫细胞的构成,探讨CD226分子参与高脂饮食诱导肥胖的免疫学机制。方法野生型(WT)和CD226KO小鼠随机分为高脂和正常饮食两组,饲喂14周,建立2型糖尿病模型。通过流式细胞术分析小鼠脾脏及外周血的免疫细胞构成。体外试验使用pshRNA-CD226慢病毒感染NK92-MI细胞,qPCR法检
抗菌药物不仅可以通过与特定靶点相结合而发挥抗菌作用,也可通过诱导活性氧(reactive oxygen species,ROS)积累造成菌体氧化损伤。细菌对于氧化应激损伤,也有相应的防御机制,对ROS进行清除及损伤修复。然而细菌体内ROS的累积在抗菌药物杀菌过程中的作用机制却极其复杂。因此,本文对抗菌药物作用下细菌发生氧化应激的机制进行综述,并简要分析现有研究存在的问题及需要进一步解决的问题。
目的筛选对H5N1流感病毒高度敏感、低致瘤性的MDCK细胞亚株,并对该细胞株进行全面的检定及分析。方法通过极限稀释法获得细胞亚株,再对各细胞亚株进行血凝滴度、受体丰度和致瘤性检测,筛选出安全性好、敏感性高的细胞亚株,然后对所筛选细胞亚株进行全面的检定。结果通过细胞克隆试验,共得到108株单细胞亚克隆株,经两轮血凝滴度初筛后得到3株细胞,再经致瘤性及受体丰度比较后选定一株亚克隆株G1作为备选细胞株。
目的研究轮状病毒(rotavirus, RV)感染对Caco-2细胞表面钠-氢(Na+-H+)交换蛋白3(NHE3)水平和生物活性的影响及其调控机制。方法构建表达NHE3的Caco-2细胞模型,分为对照组(CTL组)、RV组、细胞内Ca2+络合剂BAPTA-AM组和BAPTA-AM+RV组,用BCECF-AM法和细胞表面NHE3生物素化法测定Na+-H+交换蛋白活性和细胞表面NHE3蛋白水平,We
目的初步探讨IL-10促进鼠衣原体感染的可能分子机制。方法鼠衣原体经灌胃或子宫内感染C57BL/6野生型和IL-10-/-小鼠后,采用间接免疫荧光试验检测肠道和生殖道内鼠衣原体的生长情况;输卵管积水评分评估生殖道疾病严重程度;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血液中IFN-γ和IL-2的表达水平。结果与野生型小鼠相比,IL-10-/-小鼠的肠道和生殖道均具有较强的衣原体清除能力,同时细胞因子IFN