【摘 要】
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目的采用支化的聚乙烯亚胺(BPEI)、线型聚乙烯亚胺(LPEI)和树枝状聚合物聚酰胺-胺(PAMAM)与具有抑制激素非依赖型前列腺癌细胞PC3增殖的microRNA(miRNA)-15a和miRNA-16-1质粒
【机 构】
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第二军医大学长海医院药学部,上海交通大学附属第一人民医院临床药学科,上海中医药大学附属岳阳医院药剂科,
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目的采用支化的聚乙烯亚胺(BPEI)、线型聚乙烯亚胺(LPEI)和树枝状聚合物聚酰胺-胺(PAMAM)与具有抑制激素非依赖型前列腺癌细胞PC3增殖的microRNA(miRNA)-15a和miRNA-16-1质粒结合,构建了miRNA基因递送系统。考察形成的3种纳米复合物的粒径、zeta电位、细胞内摄取,以及对PC3细胞的抑制作用。方法利用粒径分析仪测定形成的3种纳米复合物的粒径和电位,凝胶电泳实验测定3种材料对miRNA的结合能力;利用FAM标记的NC-miRNA考察PC3细胞对3种复合物的摄取情况;通过CCK8法测定3种材料与miRNA-15a和miRNA-16-1形成的复合物对PC3细胞的抑制作用;PCR法测定3种材料与miRNA-15a和miRNA-16-1结合后对PC3细胞中Bcl-2、Cylin D1和Wnt3a表达的阻滞作用。结果BPEI、LPEI和PAMAM与miRNA可结合形成稳定的纳米级复合物,在N/P=5时,PC3细胞对BPEI/miRNAFAM的摄取高于LPEI/miRNA-FAM和PAMAM/miRNA-FAM,差异具有统计学意义(P<0.05)。BPEI、LPEI和PAMAM都可以携带miRNA-15a和miRNA-16-1进入PC3细胞,并且阻滞PC3细胞中Bcl-2、Cylin D1和Wnt3a蛋白的表达。结论BPEI、LPEI和PAMAM包裹miRNA-15a和miRNA-16-1可对激素非依赖型前列腺癌细胞PC3细胞产生抑制作用,并可以有效阻滞PC3细胞中Bcl-2、Cylin D1和Wnt3a蛋白的表达。
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