【摘 要】
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目的 探讨吲哚美辛抑制非小细胞肺癌的相关机制。方法 CCK-8检测NCI-H520、A549肺癌细胞增殖情况;克隆形成实验检测肺癌细胞增殖以及成瘤能力;分子靶向对接预测吲哚美辛相互作用蛋白;GEPIA公共数据库分析肿瘤与癌旁组织、肿瘤切除术后远期生存率与NOS3 mRNA水平关系;免疫组化检测NOS3表达水平;通过LinkedOmics数据库分析NOS3富集的基因;使用KEGG数据库分析与NOS3
【机 构】
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安徽理工大学附属淮南新华医院麻醉科
【基金项目】
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安徽省自然科学基金项目（No 1808085MH230）； 安徽理工大学重点项目基金（No fsyyzd2020-05）；
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目的 探讨吲哚美辛抑制非小细胞肺癌的相关机制。方法 CCK-8检测NCI-H520、A549肺癌细胞增殖情况;克隆形成实验检测肺癌细胞增殖以及成瘤能力;分子靶向对接预测吲哚美辛相互作用蛋白;GEPIA公共数据库分析肿瘤与癌旁组织、肿瘤切除术后远期生存率与NOS3 mRNA水平关系;免疫组化检测NOS3表达水平;通过LinkedOmics数据库分析NOS3富集的基因;使用KEGG数据库分析与NOS3调控的信号通路;MitoTracker Red CMXRos探针检测线粒体ROS生成水平;电镜下观察线粒体形态;Western blot检测ATP5A、UQCRC2、SDH8、NDUFB8的表达水平。结果 20μmol·L-1吲哚美辛可抑制肺癌细胞增殖以及成瘤能力;吲哚美辛与NOS3蛋白存在作用位点;NOS3抑制剂L-NMMA可逆转吲哚美辛抑癌作用。通过生物信息学分析发现,肺癌组织中NOS3表达较低,NOS3基因高表达患者远期生存率更长;NOS3与线粒体呼吸链通路高度负相关。吲哚美辛作用后引起线粒体数量减少、形态肿胀、內脊消失、ROS水平显著上升、显著降低UQCRC2蛋白表达。结论 吲哚美辛靶向NOS3抑制UQCRC2蛋白表达从而抑制线粒体呼吸链功能,进而在非小细胞肺癌中发挥抑癌作用。
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