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目的优化大肠杆菌生产重组人γ-干扰素摇瓶发酵工艺条件,分析摇瓶发酵过程中的制约因素。方法在摇瓶中研究了种子菌龄、接种量和诱导时机等因素对工程菌生产rhlFN-γ和质粒稳定性的影响,及优化条件下工程茵发酵参数。结果最佳条件:种子液为OD6000.5—1.5,接种量为6%,培养至OD600为1.5时42℃诱导表达4h。在此条件下,在摇瓶中使用M9II培养基时,质粒无丢失,摇瓶中rhlFN-γ的表达量占菌体总蛋白的43.2%,光密度为3.3。对发酵过程中总糖、还原糖、总氮和pH的分析表明,发酵过程中培养基中碳源