【摘 要】
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目的 探讨靶向基质全属蛋白酶-2( MMP-2)基因的RNA干扰(RNAi)技术对卵巢癌OVCAR-3细胞MMP-2的沉默作用,以及沉默MMP-2基因对OVCAR-3细胞生长、黏附、侵袭和迁移能力的影响.方法 合成特异性靶向MMP-2基因的小干扰RNA(siRNA)并转染卵巢癌OVCAR-3细胞,以非特异性序列转染细胞作为阴性对照组,以培养液代替siRNA转染细胞作为空白对照组,采用实时荧光定量P
【机 构】
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目的 探讨靶向基质全属蛋白酶-2( MMP-2)基因的RNA干扰(RNAi)技术对卵巢癌OVCAR-3细胞MMP-2的沉默作用,以及沉默MMP-2基因对OVCAR-3细胞生长、黏附、侵袭和迁移能力的影响.方法 合成特异性靶向MMP-2基因的小干扰RNA(siRNA)并转染卵巢癌OVCAR-3细胞,以非特异性序列转染细胞作为阴性对照组,以培养液代替siRNA转染细胞作为空白对照组,采用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测转染后24、48和72 h MMP-2 mRNA和蛋白的表达水平,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,利用Transwell、划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力.结果 与阴性对照组相比,OVCAR-3细胞在转染siRNA-MMP-2后24、48和72 h MMP-2 mRNA表达量分别下降了73.8％、78.8％和78.4％(均P＜0.05),蛋白表达量分别下降了72.6％、81.2％和76.4％(均P＜0.05),以48h作用最强；细胞生长曲线显示细胞生长无明显变化(P＞0.05)；60 min和90 min时的黏附抑制率分别为55.0％和44.8％(均P＜0.05)；细胞的侵袭和迁移能力分别下降29.7％和35.8％(均P＜ 0.05).结论 siRNA介导的MMP-2基因沉默能明显抑制OVCAR-3细胞的黏附、侵袭和迁移能力,而对其生长无明显影响,MMP-2基因有可能成为卵巢癌基因治疗的重要靶点。
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