【摘 要】
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目的 :为了特异封闭PC -3M高侵袭亚系尿激酶型纤溶酶原激活物受体 (u -PAR)的表达 ,观察其对侵袭能力的抑制效应。方法 :应用RT -PCR获得u -PAR的cDNA片段 ,反向插入pcDNA3质
【机 构】
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华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,华中科技大学同济医学院免疫学系,华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,华中科技大学同济医学院免疫学系
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目的 :为了特异封闭PC -3M高侵袭亚系尿激酶型纤溶酶原激活物受体 (u -PAR)的表达 ,观察其对侵袭能力的抑制效应。方法 :应用RT -PCR获得u -PAR的cDNA片段 ,反向插入pcDNA3质粒载体中 ,构建u -PAR反义核酸载体并导入高侵袭亚系中 ;借助RT -PCR和免疫组化检测转染细胞u -PAR的表达。结果 :u -PAR反义核酸载体转染株的u -PARmRNA和蛋白质水平明显低于对照组 ,抑制率分别为 53 %和 73 % ,同时其体外侵袭能力亦明显降低 ,抑制率为 79%。结论 :u -PAR反义核酸在PC -3M高侵袭亚系中发挥了特异封闭作用 ,为进一步观察u-PAR反义核酸抑制高侵袭前列腺癌细胞亚系的侵袭效应提供了细胞模型。
OBJECTIVE: To investigate the inhibitory effect of u-PKP on the invasiveness of PC-3M cells in order to specifically block the expression of u-PKP. Methods: The cDNA fragment of u-PAR was obtained by RT-PCR and inserted into pcDNA3 plasmid vector to construct u-PAR antisense vector and introduced into highly invasive subline. The transfected cells were detected by RT-PCR and immunohistochemistry u-PAR expression. Results: The u-PAR mRNA and protein levels of u-PAR antisense nucleic acid vector transfected cells were significantly lower than those of the control group, with the inhibition rates of 53% and 73%, respectively. Meanwhile, the invasive ability of u-PAR antisense vector was significantly reduced with the inhibition rate of 79%. CONCLUSION: The u-PAR antisense nucleic acid plays a specific blocking role in the PC-3M highly aggressive subline and provides a cellular model for further observation of the u-PAR antisense nucleic acid in inhibiting the invasion of highly aggressive prostate cancer cell subline.
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