【摘 要】
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目的 建立血吸虫病肝纤维化小鼠模型,观察转化生长因子β1 (TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)在小鼠血吸虫肝纤维化中的表达状况.方法 30只BALB/c小鼠随机分为模型组和对照
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科,武汉,430030;同济咸宁医院感染性疾病科,咸宁,437100
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目的 建立血吸虫病肝纤维化小鼠模型,观察转化生长因子β1 (TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)在小鼠血吸虫肝纤维化中的表达状况.方法 30只BALB/c小鼠随机分为模型组和对照组(每组15只),模型组小鼠以腹部贴片法经皮肤攻击感染日本血吸虫尾蚴(30±1)条,分别于感染后第4、6、8、10和12周两组各取3只小鼠摘眼球取血,测定血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平；采血后处死小鼠取肝组织,常规切片,经HE染色后观察各组小鼠肝组织的病理学改变,Masson染色后观察肝组织胶原显微增生情况;免疫组织化学和荧光定量PCR方法检测小鼠肝组织中TGF-β1、CTGF的蛋白和mRNA表达水平. 结果 感染后6～12周,模型组的ALT和AST水平与同期对照组比较差异统计学意义(P＜0.05).感染12周时,模型组的ALT和AST水平分别为(173.53±31.12) U/L和(301.00±34.87)U/L均高于对照组的[(42.00±3.53) U/L和(96.58±11.26) U/L].肝组织切片经HE染色后发现,模型组的肝组织有虫卵肉芽肿沉积,汇管区的纤维化特别明显,呈干线性纤维化改变,切面上见门静脉分支周围纤维组织增生呈树枝状分布；Masson染色显示,模型组的肝组织胶原纤维增生面积于感染后8周明显增加,感染后12周为(23.83± 1.68)％,与对照组[(1.23±0.14)％]的比较,差异有统计学意义(P＜0.05).感染后10和12周,模型组的TGF-β1[(22.34±2.58)％和(25.82±3.01)％]和CTGF[(11.3±22.44)％和(14.51±2.05)％]的蛋白阳性区域面积与对照组[(2.56±0.87)％和(1.09±0.73)％]的比较,差异有统计学意义(P＜0.05).感染后6、8、10和12周,模型组的TGF-β1和CTGF mRNA相对转录水平呈上升趋势,与同时段对照组的比较差异均有统计学意义(P＜0.05)；其中在感染后10周时,TGF-β1 mRNA相对转录水平最高,为0.0721±0.0187,对照组的则为0.0089±0.0037；在感染后12周时,CTGF mRNA相对转录水平最高,为0.1136±0.0365,对照组的则为0.0293±0.0184；CTGF mRNA相对转录水平与日本血吸虫感染时间有明显的相关性(r=0.927,P＜0.05).结论 BALB/c小鼠感染日本血吸虫后,肝组织中TGF-β1和CTGF蛋白阳性表达类型和表达分布区域基本一致,CTGF mRNA的相对转录水平与日本血吸虫感染时间有明显相关性.
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