【摘 要】
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为了筛选得到免疫效果较理想的核酸疫苗,采用pVAXⅠ为真核表达载体,新孢子虫P0基因为目的基因,构建了重组质粒pVAXⅠ -NcP0.用重组质粒免疫成年沙鼠60只,剂量为100 μg/只,每
【机 构】
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延边大学农学院动物医学系,科菲特饲料(齐齐哈尔)有限公司,延边州动物疫病预防控制中心
【基金项目】
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延边朝鲜族自治州科技发展计划项目;
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为了筛选得到免疫效果较理想的核酸疫苗,采用pVAXⅠ为真核表达载体,新孢子虫P0基因为目的基因,构建了重组质粒pVAXⅠ -NcP0.用重组质粒免疫成年沙鼠60只,剂量为100 μg/只,每隔14 d免疫1次,共免3次,首免后每周尾静脉采血1次,三免后第2周,每组处死7只沙鼠,无菌取脾.采用间接荧光抗体试验检测沙鼠血清抗体效价,流式细胞仪检测脾T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+数量.结果:Cp-M佐剂组、pVAX Ⅰ -NcP0组的抗体效价均高于pVAXⅠ 空载体组和对照组,其中Cp-M组效价最高；脾T淋巴细胞亚群数量测定发现,疫苗Cp-M佐剂组、pVAXⅠ -NcP0组的CD4+细胞含量均高于pVAXⅠ空载体组和对照组,Cp-M组、pVAXⅠ -NcP0组与pVAXⅠ空载体组和对照组均差异极显著(P＜0.01),Cp-M组、pVAXⅠ -NcP0组的CD8+细胞含量均高于pVAX Ⅰ空载体组和对照组,Cp-M佐剂组与pVAXⅠ空载体组和对照组差异显著(P＜0.05).表明DNA疫苗pVAXⅠ -NcP0既能较好地刺激细胞免疫又能产生一定的体液免疫反应,可作为候选核酸疫苗进行下一步本体动物免疫试验研究.
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