论文部分内容阅读
目的 探讨骨桥蛋白(OPN)对高转移潜能人肝癌细胞系HCCLM3侵袭性影响.方法 构建两个针对人OPN mRNA干扰质粒pENTRTM/U6-INF(pINF-1、2)及对照质粒pENTRTM/U6-CTR(pCTR),并将其转染HCCLM3细胞.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定OPN的mRNA表达量;Western印迹测定OPN蛋白的表达量;噻唑蓝(MTT)比色法实验检测HCCLM3的增殖力;Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭力的改变;结果与仅加转染试剂的空白对照组(2.01±0.13)相比,转染24 h后,pINF-1组OPN mRNA用RT-PCR无法检测到,pINF-2组mRNA(1.00±0.12)下降50%,而pCTR组mRNA(2.02±0.13)表达差异无统计学意义(P＞0.05).转染48 h后pINF-1组OPN蛋白表达(0.11±0.02)与空白对照组(1.02±0.11)相比下降90%;转染pINF-1后,HCC-LM3细胞的增殖力下降2%,但与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).Matrigel侵袭实验结果显示,与空白对照组(28.4±1.5)相比,转染pINF-1后HCCLM3细胞穿过人工基底膜的数量(10.2±0.8)明显减少,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 pINF-1可以特异性抑制高转移肝癌细胞系HCCLM3中OPN的表达,并显著降低其侵袭力,但对细胞增殖力影响不大,此技术有望成为抑制肝癌侵袭转移的新途径。