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摘要：利用超高效液相色谱法来进行药物分析，可以更加快速、灵敏的分析检测出药物的色相谱，并实现超高效液相分析和高效液相分析两种方法之间的自由转换，从而获得更加精准的色谱结果。基于超高效液相色谱法的应用特点，本文结合实际情况，对超高效液相色谱法中所引进的新技术、新方法及其在药物分析中的应用作详细论述，得出相关结论供同行参考。
关键词：超高效液相色谱；药物分析；应用
超高效液相色谱法是在液相色谱法以及高效液相色谱法的基础上发展起来的，在当前还属于一个科学研究新领域。超高效液相色谱法借助于超高效液相色谱法的研究理论，在其基础上引入小颗粒填料、第系统体积以及快速、灵敏检测器等技术手段，将该方法的分析通量、检测灵敏度以及色谱峰容量等做了适当的增加。随着国内药物分析技术的日益进步，超高效液相色谱法这一与时俱进的新型药物分析法已逐渐投入到液相实验中，并渗透到药物分析领域，获得了良好的社会经济效益。
一、超高效液相色谱的概述
1、超高效液相色谱的定义
超高效液相色谱法，英文简称UPLC，是一种新型的液相色谱技术。超高效液相色谱法是在液相色谱技术要求不断提高的背景下发展起来的，它的发展借助于高效液相色谱技术的理论，同时又在其基础上作了相关的改进和延伸。
2、超高效液相色谱的优点
首先，超高效液相色谱技术的优点在于：从应用效果来看，该技术在应用时具有着分析速度快、灵敏度高以及分离度好的特点。一般情况下，相比传统的高效液相色谱，超高效液相色谱技术在进行药物分析时，其分析速度相当于高效液相色谱的10倍，灵敏度提高3倍，并且在分析实验过程中，超高效液相色谱所获得的信息数据也比传统的高效液相色谱获得的信息要多上很多。
二、超高效液相色谱在药物分析中的应用
1、化学药品的分析
在对化学药品的成分或性质进行分析时，某研究人员采用了超高效液相色谱，试图用超高效液相色谱分析技术来分离并分析异烟肼，吡嗪酰胺以及利福平等药品。分析时，先采用粒径为1.7μm的色谱柱进行梯度洗脱。具体分析时，将色谱柱的温度控制在30℃，将三种结核药物完全分离开，分离时间约为2min。比起传统的高效液相色谱分析法（HPLC），超高效液相色谱的药物分离时间更短；而如果将色谱柱的温度上升到90℃，最终所获得的药物分离时间将更短。
2、生化药品的分析
与上述类似，采用超高效液相色谱法来分析圣湖药品时，同样将其与高效液相色谱技术进行对比。具体方法为：同时采用HPLC和UPLC来分析蛋白质水解物中的氨基酸成分。对比其实验结果，发现尽管两种方法所获得的数据基本都一致，但利用UPLC技术分析时，其得出结果的时间仅仅需要HPLC的40%，也就是说，超高效液相色谱法在分析生化药品时，得出分析结果的时间比高效液相色谱技术的分析时间快一倍还不止。
3、中药成分分析
中药药品中大多含有丰富的生物碱，而生物碱又属于中药中的活性成分，对用药工作有着极大影响。因此有必要对中药药品中的生物碱成分进行研究。而关于生物碱成分的研究，我们同样可采用超高效液相色谱技术来进行分析。需要注意的是，在采用超高效液相色谱技术来分析中药药品中的生物碱成分时，由于分析工作容易受到固定相表面残余硅羟基的影响，所以，此类化合物色谱峰的保留行为会发生变化，造成色谱峰严重展宽和拖尾，因而在分析时常需要在流动相中加入添加剂，如离子对试剂、有机胺类等，用以屏蔽固定相表面残余硅羟基的作用。
4、药物代谢动力学研究
药物代谢动力学涉及药物在肌体内吸收、分布、代谢和排泄过程的研究，包括药物及其在各种复杂基质中代谢物的分离、结构鉴定以及痕量分析测定。肌体的体液系统中存在大量的保留时间相同、相对分子质量也相同的干扰组分；而目前药物研制日趋低剂量，使常规的分离检测技术难以满足复杂介质中痕量成分准确定量的要求。能否在复杂的体液系统中快速检测和鉴定出药物的代谢产物，依赖于高效的色谱分离和灵敏的高分辨质谱技术的联用。采用UPLC—MS联用技术进行药物代谢及药物动力学研究，能够同时测定样品中复方制剂的多组分浓度，实现样品高通量分析。
三、超高效液相色谱的局限性
1、与UPLC匹配的色谱柱比较少
UPLC是应小粒径（小于21xm）柱填料的需求而專门设计的耐高压液相色谱系统，因此使用小粒填料的色谱柱能够最大限度地发挥UPLC高分离度和高灵敏度的优势。但是这种色谱柱要能够耐受由于粒径减小而带来的高反压，而且粒径的减小也给色谱柱充填技术带来了挑战。
2、峰面积的重复性欠佳
某研究人员发现，UPLC分析样品时峰面积的重复性略逊于HPLC，特别是低浓度样品时更加明显，其峰面积重复性的RSD约为HPLC的2倍。研究者认为，可能因UPLC的进样量过少，或者由于采用了半环进样的方式，理论上这种进样方式的精密度不如全环进样。通过稀释样品，增加注入样品的体积，可以改善这种状况。
3、对高频检测仪器的需要
UPLC分离样品色谱峰扩展很小，通常峰底宽度只有几秒钟，低浓度的样品峰则更窄。使用UPLC测定低浓度样品时，准确度、精密度都比较差。这可能是由于检测仪器探测频率比较低，检测低浓度样品时出现了样品点的遗漏。因此，随着UPLC的开发应用，必将推动高频检测仪器的进一步发展。
四、发展前景
UPLC作为一种新型液相色谱技术，延伸了液相色谱的应用范围。UPLC以超强分离能力和速度、超高灵敏度、与HPLC简单方便的方法转换、良好的质谱入口等特点为现代色谱分析开创了广阔的前景。其进样体积小，分离快，溶剂消耗少，为药物化学成分分析、药物合成分析、中药快速定性定量分析和体内代谢产物分析，提供了一种高效、准确的分析技术。充分利用UPLC的高分离效率和MS的高灵敏度与定性功能，能快速完成众多复杂成分的分离与鉴定。该联用技术既可建立中药或复方药物指纹图谱，又可进行多种有效成分或指标成分定量，还可用于体内药物分析。
五、结束语
综上所述，超高效液相色谱法作为一种新型的小颗粒填料液相色谱技术，比起先前的高效液相色谱技术，其在进行药物分析时，既能在一定程度上缩短分析时间，又能适当减少对溶剂的消耗，达到经济实用的目的。本文通过对超高效液相色谱在药物分析中的应用情况的介绍，指出超高效液相色谱法作为液相色谱技术的一种延伸，其所具有的应用特性必然会使其在未来一段时间内成为药物分析领域中的主流技术，并起到不可或缺的作用。
参考文献
[1]胡晓玲，李焕德.UPLC-MS-MS法测定健康人血浆中阿托伐他汀浓度及药物代谢动力学研究[J].中南药学.2008（04）
[2]陈佳，王钢力，姚令文，林瑞超.UPLC和HPLC方法对丹参药材中丹酚酸B含量测定结果的比对[J].药物分析杂志.2008（05）
关键词：超高效液相色谱；药物分析；应用
超高效液相色谱法是在液相色谱法以及高效液相色谱法的基础上发展起来的，在当前还属于一个科学研究新领域。超高效液相色谱法借助于超高效液相色谱法的研究理论，在其基础上引入小颗粒填料、第系统体积以及快速、灵敏检测器等技术手段，将该方法的分析通量、检测灵敏度以及色谱峰容量等做了适当的增加。随着国内药物分析技术的日益进步，超高效液相色谱法这一与时俱进的新型药物分析法已逐渐投入到液相实验中，并渗透到药物分析领域，获得了良好的社会经济效益。
一、超高效液相色谱的概述
1、超高效液相色谱的定义
超高效液相色谱法，英文简称UPLC，是一种新型的液相色谱技术。超高效液相色谱法是在液相色谱技术要求不断提高的背景下发展起来的，它的发展借助于高效液相色谱技术的理论，同时又在其基础上作了相关的改进和延伸。
2、超高效液相色谱的优点
首先，超高效液相色谱技术的优点在于：从应用效果来看，该技术在应用时具有着分析速度快、灵敏度高以及分离度好的特点。一般情况下，相比传统的高效液相色谱，超高效液相色谱技术在进行药物分析时，其分析速度相当于高效液相色谱的10倍，灵敏度提高3倍，并且在分析实验过程中，超高效液相色谱所获得的信息数据也比传统的高效液相色谱获得的信息要多上很多。
二、超高效液相色谱在药物分析中的应用
1、化学药品的分析
在对化学药品的成分或性质进行分析时，某研究人员采用了超高效液相色谱，试图用超高效液相色谱分析技术来分离并分析异烟肼，吡嗪酰胺以及利福平等药品。分析时，先采用粒径为1.7μm的色谱柱进行梯度洗脱。具体分析时，将色谱柱的温度控制在30℃，将三种结核药物完全分离开，分离时间约为2min。比起传统的高效液相色谱分析法（HPLC），超高效液相色谱的药物分离时间更短；而如果将色谱柱的温度上升到90℃，最终所获得的药物分离时间将更短。
2、生化药品的分析
与上述类似，采用超高效液相色谱法来分析圣湖药品时，同样将其与高效液相色谱技术进行对比。具体方法为：同时采用HPLC和UPLC来分析蛋白质水解物中的氨基酸成分。对比其实验结果，发现尽管两种方法所获得的数据基本都一致，但利用UPLC技术分析时，其得出结果的时间仅仅需要HPLC的40%，也就是说，超高效液相色谱法在分析生化药品时，得出分析结果的时间比高效液相色谱技术的分析时间快一倍还不止。
3、中药成分分析
中药药品中大多含有丰富的生物碱，而生物碱又属于中药中的活性成分，对用药工作有着极大影响。因此有必要对中药药品中的生物碱成分进行研究。而关于生物碱成分的研究，我们同样可采用超高效液相色谱技术来进行分析。需要注意的是，在采用超高效液相色谱技术来分析中药药品中的生物碱成分时，由于分析工作容易受到固定相表面残余硅羟基的影响，所以，此类化合物色谱峰的保留行为会发生变化，造成色谱峰严重展宽和拖尾，因而在分析时常需要在流动相中加入添加剂，如离子对试剂、有机胺类等，用以屏蔽固定相表面残余硅羟基的作用。
4、药物代谢动力学研究
药物代谢动力学涉及药物在肌体内吸收、分布、代谢和排泄过程的研究，包括药物及其在各种复杂基质中代谢物的分离、结构鉴定以及痕量分析测定。肌体的体液系统中存在大量的保留时间相同、相对分子质量也相同的干扰组分；而目前药物研制日趋低剂量，使常规的分离检测技术难以满足复杂介质中痕量成分准确定量的要求。能否在复杂的体液系统中快速检测和鉴定出药物的代谢产物，依赖于高效的色谱分离和灵敏的高分辨质谱技术的联用。采用UPLC—MS联用技术进行药物代谢及药物动力学研究，能够同时测定样品中复方制剂的多组分浓度，实现样品高通量分析。
三、超高效液相色谱的局限性
1、与UPLC匹配的色谱柱比较少
UPLC是应小粒径（小于21xm）柱填料的需求而專门设计的耐高压液相色谱系统，因此使用小粒填料的色谱柱能够最大限度地发挥UPLC高分离度和高灵敏度的优势。但是这种色谱柱要能够耐受由于粒径减小而带来的高反压，而且粒径的减小也给色谱柱充填技术带来了挑战。
2、峰面积的重复性欠佳
某研究人员发现，UPLC分析样品时峰面积的重复性略逊于HPLC，特别是低浓度样品时更加明显，其峰面积重复性的RSD约为HPLC的2倍。研究者认为，可能因UPLC的进样量过少，或者由于采用了半环进样的方式，理论上这种进样方式的精密度不如全环进样。通过稀释样品，增加注入样品的体积，可以改善这种状况。
3、对高频检测仪器的需要
UPLC分离样品色谱峰扩展很小，通常峰底宽度只有几秒钟，低浓度的样品峰则更窄。使用UPLC测定低浓度样品时，准确度、精密度都比较差。这可能是由于检测仪器探测频率比较低，检测低浓度样品时出现了样品点的遗漏。因此，随着UPLC的开发应用，必将推动高频检测仪器的进一步发展。
四、发展前景
UPLC作为一种新型液相色谱技术，延伸了液相色谱的应用范围。UPLC以超强分离能力和速度、超高灵敏度、与HPLC简单方便的方法转换、良好的质谱入口等特点为现代色谱分析开创了广阔的前景。其进样体积小，分离快，溶剂消耗少，为药物化学成分分析、药物合成分析、中药快速定性定量分析和体内代谢产物分析，提供了一种高效、准确的分析技术。充分利用UPLC的高分离效率和MS的高灵敏度与定性功能，能快速完成众多复杂成分的分离与鉴定。该联用技术既可建立中药或复方药物指纹图谱，又可进行多种有效成分或指标成分定量，还可用于体内药物分析。
五、结束语
综上所述，超高效液相色谱法作为一种新型的小颗粒填料液相色谱技术，比起先前的高效液相色谱技术，其在进行药物分析时，既能在一定程度上缩短分析时间，又能适当减少对溶剂的消耗，达到经济实用的目的。本文通过对超高效液相色谱在药物分析中的应用情况的介绍，指出超高效液相色谱法作为液相色谱技术的一种延伸，其所具有的应用特性必然会使其在未来一段时间内成为药物分析领域中的主流技术，并起到不可或缺的作用。
参考文献
[1]胡晓玲，李焕德.UPLC-MS-MS法测定健康人血浆中阿托伐他汀浓度及药物代谢动力学研究[J].中南药学.2008（04）
[2]陈佳，王钢力，姚令文，林瑞超.UPLC和HPLC方法对丹参药材中丹酚酸B含量测定结果的比对[J].药物分析杂志.2008（05）