【摘 要】
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目的 用建立的贝氏柯克斯体毒力相关基因芯片研究贝氏柯克斯体与其致病性相似的专性胞内寄生菌(立克次体、埃立克体、新立克次体),以及与其密切相关的兼性胞内寄生菌(巴通体
【机 构】
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北京市丰台区疾病预防控制中心,北京100071;军事医学科学院微生物流行病研究所,北京100071;北京市丰台区疾病预防控制中心,北京,100071
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目的 用建立的贝氏柯克斯体毒力相关基因芯片研究贝氏柯克斯体与其致病性相似的专性胞内寄生菌(立克次体、埃立克体、新立克次体),以及与其密切相关的兼性胞内寄生菌(巴通体和肺炎军团菌)等病原菌的毒力基因的差异.方法 贝氏柯克斯体国际标准株-九里株作为本研究参考株,从全基因序列中选取166个毒力及毒力相关基因进行PCR扩增,纯化后的产物制备基因芯片.采用双色荧光标记,待测DNA(即用于分析的各菌株基因组DNA)用Cy5标记,贝氏柯克斯体九里株参照基因组DNA用Cy3标记.芯片杂交后,采用软件GenePix Pro4.1,辅助以软件Excel,进行图片处理和数据分析.结果 芯片的166个基因片段中有165个存在于所有贝氏柯克斯体属的6个分离株中,另一锚定蛋白( AnkI)基因(CBU1213)仅存在于九里株及Grita株；立克次体属的5株菌株均与CBU1631和CBU1125杂交；埃立克体属的3种菌株与新立克次体属的3种菌株均含有基因CBU1125；东方属的1株菌株具有基因CBU1449,而巴通体属的菌株,军团菌和大肠杆菌与基因芯片均无杂交.结论 贝氏柯克斯体种内基因组具有高度保守性,它的专性细胞内寄生菌的毒力相关基因与胞外寄生菌的毒力相关基因有非常显著差异.
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