面包酵母麦芽糖酶的异源表达及产酶条件优化

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通过设计特异性引物从快速发酵面包酵母BY-14中PCR克隆获得麦芽糖酶编码基因。选择BamH I和Hind III分别为上下游引物的酶切位点,将麦芽糖酶基因克隆到pET28a载体上。表达质粒经PCR扩增、双酶切和测序进行验证。正确的表达质粒pET28a-Mal62导入大肠杆菌宿主BL(21),经IPTG诱导表达,结果显示,重组蛋白能够可溶性表达。随后对大肠杆菌产酶条件进行优化,结果表明,当IPTG终浓度为0.4 mmol/L,菌浓OD600达到1.0时加入诱导剂,在26℃下振荡培养12 h可获得最高的产酶
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