【摘 要】
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目的研究多巴胺（DA）对神经细胞摄取谷氨酸（Glu）能力的影响，以及DA通过通路对轻微型肝性脑病（MHE）大鼠认知障碍的影响。方法45只SD大鼠随机分为对照组，MHE模型组和DA干预模型组（n = 15），其中MHE模型组采用硫代乙酰胺（TAA）腹腔注射、DA干预组采用脑室内注射DA、对照组大鼠腹腔注射等渗盐水，每周2次，共8周；采用脑活体微透析检测MHE大鼠和DA干预大鼠的脑内Glu含量变化，实
【机 构】
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325000 温州医科大学附属第一医院 浙江省神经老化与疾病研究重点实验室,325000 温州医科大学附属第一医院神经外科,325000 温州医科大学附属第一医院外科实验室,325000 温州医科大学
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目的研究多巴胺（DA）对神经细胞摄取谷氨酸（Glu）能力的影响，以及DA通过通路对轻微型肝性脑病（MHE）大鼠认知障碍的影响。
方法45只SD大鼠随机分为对照组，MHE模型组和DA干预模型组（n = 15），其中MHE模型组采用硫代乙酰胺（TAA）腹腔注射、DA干预组采用脑室内注射DA、对照组大鼠腹腔注射等渗盐水，每周2次，共8周；采用脑活体微透析检测MHE大鼠和DA干预大鼠的脑内Glu含量变化，实时定量PCR和免疫印迹分析等检测痕量胺相关受体1（TAAR1）、兴奋性氨基酸转运子2（EAAT2）基因mRNA和蛋白质相对表达量；TAAR1微小RNA（siRNA）和TAAR1质粒侧脑室注射MHE大鼠和DA干预大鼠后检测EAAT2表达情况和细胞外Glu水平变化。计量资料是正态分布且满足方差齐性检验，多组间比较采用单因素方差分析；否则多组间比较采用非参数检验。等级资料多组间比较，采用非参数检验。
结果MHE大鼠与对照组相比，DA含量在肝组织[（4.90±0.13）ng/g对比（1.20±0.13）ng/g]、血清[（16.32±1.01）pmol/ml对比（5.50±0.82）pmol/ml]和脑组织[（732.45±78.85）ng/g对比（387.00±23.36）ng/g]均显著升高，P值均< 0.05，差异均有统计学意义。DA干预大鼠在脑室内注射DA后，在40～120 min之间细胞外Glu含量显著升高。在MHE大鼠和DA干预大鼠组，TAAR1蛋白相对表达量分别为3.72±0.50、4.18±0.43，与对照组的0.96±0.40相比，显著增高，P值均< 0.05，差异均有统计学意义。MHE大鼠和DA干预组大鼠的EAAT2蛋白相对表达水平与对照组相比，显著下降（0.46±0.16对比0.92±0.11，P = 0.013；0.51±0.20对比0.92±0.11，P = 0.036），差异均有统计学意义。MHE大鼠和DA干预大鼠经TAAR1 siRNA干预后脑组织中EAAT2蛋白相对表达量与空载体处理模型组相比上调（0.86±0.142对比0.56±0.060，P = 0.028；0.99±0.056对比0.43±0.098，P = 0.001），且脑内细胞外的Glu含量在60～120 min显著减少。而MHE大鼠和DA干预组大鼠经TAAR1质粒干预后与对照组比较，脑组织中EAAT2蛋白相对表达量下调（0.20±0.040对比0.48±0.08；0.24±0.05对比0.54±0.07），P值均< 0.05，差异均有统计学意义；且脑内细胞外的Glu含量在60～100 min显著升高。
结论DA通过与脑组织中的TAAR1相互作用引起细胞外Glu蓄积，导致MHE大鼠脑组织中TAAR1-EAAT2信号通路紊乱，最终损伤其认知功能。
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