九个苯丙氨酸羟化酶基因单点突变重组质粒的构建和鉴定

来源 :解放军医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：macrosoft

【摘要】

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目的构建Y154H、R157I、Y206C、G247R、D282G、G346R、S349A、A389G、R400K9个PAH基因突变型重组质粒,为下一步研究这些PAH突变体在哺乳动物细胞中表达蛋白功能奠定基础。方

【作者】

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白晋丽瞿宇晋金煜炜王红宋昉

【机构】

：

首都儿科研究所遗传室

【出处】

：

解放军医学杂志

【发表日期】

：

2008年5期

【关键词】

：

PAH基因点突变质粒 PAH gene point mutation plasmids

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目的构建Y154H、R157I、Y206C、G247R、D282G、G346R、S349A、A389G、R400K9个PAH基因突变型重组质粒,为下一步研究这些PAH突变体在哺乳动物细胞中表达蛋白功能奠定基础。方法①选择错义突变位点。结合突变位点所在酶蛋白的结构域（如催化结构域或与辅因子BH4结合位点）及患儿相关临床表型进行了9个突变位点的选择。②构建PAH基因突变型重组质粒。以野生型PAH真核表达载体pcDNA3.0-PAH-wt为模板,应用PrimerPremier5.0软件自行设计了9对突变引物,并

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