【摘 要】
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目的 研究人视网膜色素上皮(RPE)细胞对吲哚青绿(ICG)的摄取和代谢规律以及ICG在细胞内的亚细胞定位.方法将RPE细胞与0.25 mg/m1 ICG在37℃暗箱中共同孵育1、4、24 h后,应用透射电子显微镜观察细胞浆内ICG颗粒和细胞超微结构改变.荧光显微镜下观察RPE细胞与ICG共同孵育1、2、4、8、12、24、48 h后细胞浆内ICG的自发荧光.应用紫外/可见光分光光度计测定梯度稀释
【机 构】
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目的 研究人视网膜色素上皮(RPE)细胞对吲哚青绿(ICG)的摄取和代谢规律以及ICG在细胞内的亚细胞定位.方法将RPE细胞与0.25 mg/m1 ICG在37℃暗箱中共同孵育1、4、24 h后,应用透射电子显微镜观察细胞浆内ICG颗粒和细胞超微结构改变.荧光显微镜下观察RPE细胞与ICG共同孵育1、2、4、8、12、24、48 h后细胞浆内ICG的自发荧光.应用紫外/可见光分光光度计测定梯度稀释的ICG溶液805 nm吸光度[A,旧称光密度(OD)]值,绘制ICG溶液浓度的标准曲线,计算ICG浓度与A值的相关公式.RPE细胞与ICG共同孵育1、2、4、8、12、24、48、72 h后检测上清液805 nm A值,代入公式,计算细胞对ICG的吸收情况.RPE细胞与ICG共同孵育24 h后,1周内每次取1个样本进行透射电子显微镜和荧光显微镜检查,记录RPE细胞对ICG的代谢周期.结果ICG进入细胞后,在细胞浆内均匀分布.0.25 mg/m1 ICG作用RPE细胞24 h后,对细胞超微结构无显著影响.RPE对ICG的吸收随孵育时间延长逐渐增加.共同孵育24 h后,RPE细胞对ICG的摄取达高峰,以后由于细胞对其缓慢代谢而逐渐下降.1周后RPE细胞内仍有微量ICG残留.结论RPE细胞通过主动转运摄取ICG.ICG在RPE细胞内代谢周期较长.这一特点是ICG在玻璃体手术中对视网膜具有潜在毒性的机制之一。
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