【摘 要】
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目的通过比较培养大鼠星形胶质细胞在有血清培养基和无血清培养基中的形态及水通道蛋白-4(AQP-4)表达水平,探讨血脑屏障破坏对AQP-4表达的影响。方法取雌性Wistar大鼠大脑皮
【机 构】
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首都医科大学北京市神经外科研究所病理生理室首都医科大学附属北京天坛医院;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.81271286);北京市自然科学基金项目(No.7152027);北京市神经外科研究所创新探索基金项目(No.2017-5)~~
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目的通过比较培养大鼠星形胶质细胞在有血清培养基和无血清培养基中的形态及水通道蛋白-4(AQP-4)表达水平,探讨血脑屏障破坏对AQP-4表达的影响。方法取雌性Wistar大鼠大脑皮层细胞,分别在无血清培养基、DMEM培养基加10%胎牛血清(FBS)及无血清培养基加10%FBS中培养。倒置相差显微镜观察星形胶质细胞形态和大小,细胞免疫荧光染色及逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、AQP-4及代谢型谷氨酸受体5(m Glu R5)的表达水平。结果在无血清培养基中,星形胶质细胞的细胞核和胞体小且突起细长,折光性强;而在两种添加10%FBS培养基中,星形胶质细胞呈多角扁平形且突起短小,折光性弱。细胞免疫荧光及RT-q PCR结果分析显示,两种加10%FBS培养基中星形胶质细胞GFAP和AQP-4的蛋白和m RNA表达水平均低于无血清培养基(P<0.001),而m Glu R5蛋白和m RNA表达无显著性差异(P>0.05)。结论血清改变培养星形胶质细胞的形态,降低GFAP和AQP-4的表达。
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