【摘 要】
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目的 对Notch1进行表达沉默后,探究其是否可能通过调控人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)表达对非小细胞肺癌A549细胞干性及阿霉素耐药性产生影响.方法 将A549细胞设置为对照组、NC-shRNA组(转染NC-shRNA)、Notch1-shRNA组(转染Notch1-shRNA)、Notch1-shRNA+bpV(phen)组(转染Notch1-shRNA后添加100 nmol/L PTEN抑制剂bpV(phen)),采用qRT-PCR检测A549细胞中Notch1 mRNA表达情况.肿瘤成球
【机 构】
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河北省胸科医院急诊科,石家庄 050041;河北省胸科医院消化内科;河北省胸科医院护理部;河北医科大学第四医院放疗科
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目的 对Notch1进行表达沉默后,探究其是否可能通过调控人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)表达对非小细胞肺癌A549细胞干性及阿霉素耐药性产生影响.方法 将A549细胞设置为对照组、NC-shRNA组(转染NC-shRNA)、Notch1-shRNA组(转染Notch1-shRNA)、Notch1-shRNA+bpV(phen)组(转染Notch1-shRNA后添加100 nmol/L PTEN抑制剂bpV(phen)),采用qRT-PCR检测A549细胞中Notch1 mRNA表达情况.肿瘤成球实验检测肿瘤成球情况.细胞划痕实验检测A549细胞迁移情况.Western blot检测A549细胞内八聚体结合转录因子4(OCT4)、CD133、醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)、PTEN、c-Myc、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达情况.MTT检测A549细胞阿霉素耐药性.结果 与对照组相比,Notch1-shRNA组肿瘤成球率、细胞迁移率、存活率、MMP-9、MMP-2、OCT4、CD133、ALDH1A1、c-Myc、CyclinD1表达水平、阿霉素耐药性均降低(P<0.05),PTEN表达水平增加(P<0.05).与Notch1-shRNA组相比,Notch1-shRNA+bpV(phen)组肿瘤成球率、细胞迁移率、存活率、MMP-9、MMP-2、OCT4、CD133、ALDH1A1、c-Myc、CyclinD1表达水平、阿霉素耐药性均显著增加,而PTEN表达水平显著降低(P<0.05).结论 Notch1表达下调可通过促进PTEN表达抑制A549细胞干性及阿霉素耐药性.
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