【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MINCR靶向微小RNA(miR)-876-5p调控膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的分子机制.方法 体外培养人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1与膀胱癌细胞系T2
【机 构】
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浙江省台州市立医院泌尿外科 318099
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目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MINCR靶向微小RNA(miR)-876-5p调控膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的分子机制.方法 体外培养人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1与膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3,采用反转录与荧光定量聚合酶链反应法检测LncRNA MINCR和miR-876-5p的表达量;将 si-NC、si-MINCR、miR-NC、miR-876-5p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-876-5p、si-MINCR+anti-miR-NC、si-MINCR+anti-miR-876-5p 转染入 T24细胞,分别记为si-NC 组、si-MINCR 组、miR-NC 组、miR-876-5p 组、anti-miR-NC 组、anti-miR-876-5p 组、si-MINCR+anti-miR-NC 组、si-MINCR+anti-miR-876-5p 组;采用噻唑蓝法检测细胞活力;采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA MINCR与miR-876-5p的靶向关系;蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9、天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)蛋白表达量.结果 与SV-HUC-1细胞比较,膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3中LncRNA MINCR的表达水平升高[(2.25±0.20)、(1.84±0.18)、(1.61±0.12)比(1.00±0.10)],miR-876-5p 的表达水平降低[(0.38±0.03)、(0.46±0.04)、(0.51±0.05)比(1.02±0.12)](均P＜0.05).与 miR-NC 组比较,miR-876-5p 组细胞活力降低,迁移及侵袭细胞数减少,凋亡率升高,CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低,Cleaved-caspase-3蛋白水平升高(均P＜0.05).双荧光素酶报告实验证实LncRNA MINCR能够靶向结合miR-876-5p.与si-MINCR+anti-miR-NC组比较,si-MINCR+anti-miR-876-5p组细胞活力升高,迁移及侵袭细胞数增多,凋亡率降低,CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白水平升高,Cleaved-caspase-3蛋白水平降低(均P＜0.05).结论 抑制LncRNA MINCR表达可减弱膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,并诱导细胞凋亡,其作用机制与靶向调控miR-876-5p的表达有关.
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