食管癌Mal基因5'调控区的克隆及序列分析

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目的探讨Mal基因在人食管癌中表达下调的机制.方法 Mal基因5'调控区是一高G+C含量的区域,总G+C含量占67.08%(487/726个),经优化PCR反应条件扩增正常胎盘组织和人食管癌细胞系EC9706、EC8712、EC109的Mal基因5'端调控区,对PCR产物进行克隆和序列测定,对测序结果进行相互比较.结果成功地扩增出Mal基因5'调控区.与正常胎盘组织相比,食管癌细胞系EC9706、EC8712、EC109均有Mal基因5'调控区第654位的T→C改变,相应的密码子TCC变为CCC,所编码的氨基酸由丝氨酸变为脯氨酸;EC9706还有第657位的T→C改变,相应的密码子TGC变为CGC,所编码的氨基酸由半胱氨酸变为精氨酸;EC8712有第139位的A→G改变,相应的密码子GGA变为GGG,所编码的甘氨酸仍为甘氨酸.结论建立了Mal基因5'调控区的PCR扩增方法;食管癌Mal基因5'调控区可能存在点突变.
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