【摘 要】
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根据猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白基因（mrp）的序列,设计并合成了1对特异性引物,以青海株的基因组DNA为模板扩增了mrp基因ORF1序列。将PCR产物进行了T/A克隆,转化大肠杆菌,鉴定成
【机 构】
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兰州大学医学试验中心,中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室
【基金项目】
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国家重点基础研究发展规划（973）前期专项（2004CCA00500）.
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根据猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白基因（mrp）的序列,设计并合成了1对特异性引物,以青海株的基因组DNA为模板扩增了mrp基因ORF1序列。将PCR产物进行了T/A克隆,转化大肠杆菌,鉴定成功获得目的片段后,将其定向亚克隆到pET-28a（＋）中,构建了原核表达质粒pET-28a-mrp,并将其转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中,经1 mmol/L IPTG诱导和SDS-PAGE分析,出现了与预期目的蛋白一致的外源蛋白带（27.0 ku）。Western-blot分析表明,该融合蛋白具有MRP的抗原表位。研
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