【摘 要】
：
为构建猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)2型(PCV2)感染性DNA克隆,以淋巴结病料组织中分离的PCV2细胞培养适应毒株为材料,通过基因序列分析比对,在PCV2基因组序列XbaⅠ酶切
【基金项目】
：
浙江省自然科学基金项目(LY15C010006);浙江省科技厅项目(2018C37051);国家自然科学基金项目(31101831)
论文部分内容阅读
为构建猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)2型(PCV2)感染性DNA克隆,以淋巴结病料组织中分离的PCV2细胞培养适应毒株为材料,通过基因序列分析比对,在PCV2基因组序列XbaⅠ酶切位点区设计重叠引物,进行全长扩增并克隆至pMD-18T和pBluescript SK,获得载体pMD-PCV2和pBluescript SK-PCV2。将pMDPCV2重组质粒大量扩增后,用XbaⅠ切出PCV2全基因组,在体外用T4DNA连接酶使其自环化。通过脂质体法将PCV2自环化产物转染至PK15细胞,并且经15次连续传代,分别用PCR、RT-PCR和间接免疫荧光测定(Indirect immunofluorescence assay,IFA)检测到PCV2的复制、转录和蛋白表达。该研究成功构建具有感染性的PCV2全基因组DNA,为PCV2致病机理和基因功能研究奠定基础。
其他文献
浙江开放的决心和步伐从未因疫情而改变。近日,浙江正式出台《浙江省人民政府关于做好稳外资工作的若干意见》。这是继2018年《浙江省人民政府关于促进外资增长的若干意见》
"双支柱"调控框架下深化金融改革,健全金融监管体系,防止发生系统性金融风险已是我国金融工作的重要主题。通过系统性地梳理国内外有关系统性金融风险的文献研究,对系统性金
Blum数是形如pk11qk21(p1和q1是模4余3的不同素数,且k1和k2是奇整数)的整数.目前,该类整数在密码学领域中得到了广泛的应用.尽管证明一个秘密整数是Blum整数的零知识证明系统
随着业务审批权的下放,自贸试验区的内资融资租赁企业迎来快速发展的新机遇,这对缓解当地企业融资约束和压力,促进设备投资的作用愈发突显。自贸试验区良好的营商环境提升了
坚持和完善中国特色社会主义制度、推进国家治理体系和治理能力现代化,是一场深刻的制度变革和治理变革。推进国家治理现代化,需要充分认识我国制度体系的优势和短板,辩证看
为促进路网规划辅助软件的开发和应用推广以及国内路网规划方法的改进和完善,本文在学习TransCAD软件功能的基础上,应用TransCAD软件进行了交通需求预测,完成了路网规划工作
本论文着重探讨的是著名歌唱家卡拉斯的演唱特点,作为20世纪最具影响力的歌唱家之一的卡拉斯复活了19世纪美声学派的一些传统剧目,尤其在歌剧演唱上更是卓越,卡拉斯对工作的
水利水电工程建设项目中,防渗墙工程是重要的隐蔽工程,其建设过程中,在勘察、设计、施工、检测和验收等各个环节皆存在一些问题.本文结合多年工程实践和实例分析,剖析了当前
叙述在现行的亚麻湿纺工艺路线中，通过合理地选择了工艺路线，确定工艺参数，将粗硬的机器短麻原料和丝绢原料充分均匀地混合，并将混合的粗纱在脱胶设备中对丝绢实施微观化学保护的
葛惠男教授认为,肠系膜上动脉压迫综合征根据其临床表现,可归属于中医"呕吐""胃痛""痞满"等范畴,临床上以肝胃不和证型最为多见,其次为脾胃壅滞,主要治疗原则为疏肝泻肝、理