胰岛素样生长因子结合蛋白-1启动子的克隆与序列分析

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用酚氯仿抽提法提取SD大鼠的肝脏基因组DNA,PCR扩增胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)启动子并克隆至pUC118载体.从含IGFBP-1启动子的质粒中酶切分离出IGFBP-1启动子并测序.PCR扩增出420 bp的目的DNA片段,与文献报道的IGFBP-1启动子DNA大小一致.经正、反两方向序列分析显示,克隆的基因序列和GenBank数据库中的IGFBP-1启动子基因序列一致.以上结果表明克隆成功了IGFBP-1启动子基因,为构建具双向调节的胰岛素分泌调控基因质粒奠定了基础.
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