谷胱甘肽生产菌重组巴斯德毕赤氏酵母的构建

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目的:构建一株新型的产谷胱甘肽的重组巴斯德毕赤氏酵母,并研究该重组菌合成谷胱甘肽的能力;方法:利用PCR技术克隆来源于酿酒酵母的1-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶编码基因GSHI和谷胱甘肽合成酶的基因GSH2,串联插入表达载体pGAPZA,转化Pichia pastoris GS115,在Zeocin平板上挑选阳性转化子,并对阳性转化重组菌进行摇瓶培养筛选。结果:得到一株GSH的产量高达162.2mg/L重组菌,说明串联表达酿酒酵母GSH1和GSH2基因,重组甲醇酵母生产谷胱甘肽可以达到较高的水平。
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