生长激素受体信号相关因子在斑马鱼中的比较表达分析及GHR信号通路体内研究模型的建立

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GHR信号通路在动物出生后的生长中扮演着重要角色.实验利用斑马鱼模型研究了GHR信号相关基因在成体组织、胚胎发育以及幼体期的表达情况,这些基因包括gh、ghra、ghrb、jak2a、jak2b、statS.1、stat5.2、igf1、c-fos、socsl和socs2.值得关注的是,上述的大部分基因都存在母源性表达,且它们的合子表达均起始在体节早期之前.这说明在有功能性的脑垂体形成之前和完善的循环系统建立之前,GH及GH信号相关因子就已经存在于早期胚胎中,因此GH很可能是控制胚胎发育的一系列自分泌/旁分泌生长因子中的一员.同时,我们发现成体组织的SocS表达水平与GH信号靶基因igf1和c-fos的表达呈某种程度的负相关.我们利用实时定量PCR技术和荧光素酶分析技术,通过注射GH和GHR表达载体,在斑马鱼胚胎中分析了它们促进GH信号靶基因c-fos和igfl转录活性以及GH应激启动子spi12.1活性的能力.由此,研究利用斑马鱼胚胎建立一个体内研究模型来评估发育过程中的GH信号激活(GHSA).在受精后1天(dpf)和3dpf斑马鱼胚胎中,单独过表达gh或ghr均可以显著刺激GHSA,这表明在ldpf的斑马鱼胚胎中即存在功能性的GH和GHR蛋白表达,而这一时期是在功能性垂体的形成之前的.gh以及ghr的协同过表达则可以显著放大gh或ghr单独过表达的GHSA效果.
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