【摘 要】
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目的：获得能应用于治疗铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）感染的抗Pcr V蛋白全人源单克隆抗体。方法：以铜绿假单胞菌PAO1基因组为模板,PCR扩增Pcr V基因并构建重组表达载体p
【机 构】
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广西医科大学,军事医学科学院基础医学研究所免疫学研究室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助(31170074)
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目的：获得能应用于治疗铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）感染的抗Pcr V蛋白全人源单克隆抗体。方法：以铜绿假单胞菌PAO1基因组为模板,PCR扩增Pcr V基因并构建重组表达载体p ET-28a-Pcr V,转化至大肠杆菌BL21（DE3）,利用IPTG诱导表达,并通过镍离子螯合树脂亲和纯化Pcr V蛋白。利用噬菌体抗体库筛选Pcr V结合的噬菌体克隆并进行序列测定,以测序正确的阳性克隆质粒为模板,PCR扩增该抗体的重链可变区基因和轻链可变区基因并构建重组表达载体转染至293E
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