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用套叠PCR法扩增里氏木霉（Trichodermareesei）的葡聚糖内切酶Ⅱ（egⅡ）基因。扩增基因经EcoRI和NotI双酶切后克隆进P．pastoris表达载体pPICgk，获得重组表达质粒pPIC9K—egⅡ。通过电转法将egⅡ基因重组于P．pastoris基因组，筛选高G418抗性的转化子作为工程茵。工程菌的发酵在生物反应器中进行，在50L的发酵罐中加入20L发酵液。连续24h补加甘油-PTM4增殖细胞，然后以甲醇为碳源诱导缮Ⅱ基因表达48h。放罐时生物量为氏00=203，重组EGⅡ产量为90