【摘 要】
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目的:用大剂量冲击诱导法建立卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP。通过检测Akt/mTOR通路相关蛋白在SKOV3/DDP细胞株中的表达,以探讨顺铂耐药的可能机制。方法:采用顺铂20μg/ml,
【机 构】
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中山大学孙逸仙纪念医院妇产科,中山市人民医院
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目的:用大剂量冲击诱导法建立卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP。通过检测Akt/mTOR通路相关蛋白在SKOV3/DDP细胞株中的表达,以探讨顺铂耐药的可能机制。方法:采用顺铂20μg/ml,反复间歇24h冲击诱导法建立卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP,验证其耐药指数(RI)及生物学指标。Western blot法检测SKOV3/DDP、SK-OV3细胞中Akt/mTOR通路相关蛋白p-Akt、mTOR、p70S6K的表达。结果:(1)SKOV3/DDP细胞耐药指数(RI)为3.079,较SKOV3细胞升高约3倍;(2)SKOV3/DDP细胞的生长速度较SKOV3细胞明显减慢;SKOV3/DDP与SKOV3的G0～G1期细胞所占比例分别为59.02%,44.32%,两者比较差异显著(P=0.029),其中前者出现G0～G1期阻滞;(3)Western blot检测结果显示:①无顺铂作用下,SKOV3/DDP与SKOV3细胞相比,p-Akt蛋白水平升高,mTOR、p70S6K水平下降。②30μg/ml顺铂作用后,p-Akt蛋白表达水平在SKOV3细胞中显著升高,而在SKOV3/DDP细胞中变化不明显;p-mTOR蛋白水平在两者中均有上调趋势,但在SKOV3/DDP细胞中变化较显著;p70S6K蛋白水平亦在两者中均有上调趋势,但趋势不显著,SKOV3/DDP细胞的总体水平低于SKOV3细胞。结论:大剂量冲击诱导方式可以成功建立卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP;Akt/mTOR通路与顺铂耐药细胞株形成有关。
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