【摘 要】
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根据华癸中慢生根瘤菌7653R全局转录组分析结果,获得在共生固氮阶段显著上调表达的基因MCHK8182;设计重叠延伸PCR引物,构建MCHK8182双交换突变重组质粒载体;通过三亲本杂交,
【机 构】
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华中农业大学农业微生物学国家重点实验室
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(“973”计划)(2010CB126500),国家自然科学基金项目(31371549),高等学校博士点基金专项(20110146110012)
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根据华癸中慢生根瘤菌7653R全局转录组分析结果,获得在共生固氮阶段显著上调表达的基因MCHK8182;设计重叠延伸PCR引物,构建MCHK8182双交换突变重组质粒载体;通过三亲本杂交,将突变载体导入7653R;在蔗糖压力培养下进行筛选,最终获得MCHK8182双交换突变株。PCR及测序验证双交换突变株构建成功。植物盆栽试验结果显示,与7653R野生型接种的植株相比,MCHK8182突变菌株接种的植株根瘤数减少,但固氮酶活未见明显差异。
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