提高SPF种蛋质量及其孵化率的经验探讨

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  中图分类号:S831.2 文献标识码:B 文章编号:1673-1085(2021)8-0026-04
  我国兽医生物制品规程(2001年版)明确规定:禽用病毒性活疫苗的毒种、活疫苗以及病毒性灭活苗的毒种、生产用毒种的制备,必须使用SPF鸡胚或利用SPF鸡胚制备的细胞培养物。 SPF鸡及其鸡胚是进行生命科学研究和病毒学研究的标准实验动物,是生产和鉴定人、畜禽等多种生物制品的高标准原材料。通过饲料、营养和管理等技术提高SPF种蛋的孵化率和鸡胚健活率,对于提高SPF种蛋的综合利用率、降低生产成本,具有十分重要的意义。笔者结合多年饲养SPF鸡以及到疫苗生产厂家服务的经验,从SPF种蛋的选择、饲料、营养、储存、孵化、消毒等多个环节进行归纳总结,旨在提高SPF种蛋的孵化率和利用率。
  1 选择微生物和遗传均合格的SPF鸡群
  首先,应提供种蛋生产方SPF鸡群近期微生物监测合格的报告,鸡群检测的时间应控制在2~4周以内。最好既有第三方检测报告,又有自检的报告;其次,应提供SPF鸡群的遗传背景。SPF鸡品系的近交代次不宜过高,因为近亲繁殖不仅会降低鸡胚的活力,还可导致鸡胚的死胚率增加。研究表明,鸡群的近交系数每增加10%,孵化率就会降低4.4%,可能是因为种蛋“尿囊”合拢差,导致死胚增多,孵化率降低;第三,种蛋的外观要合符规定。如蛋壳的颜色最好是白色,蛋形应为椭圆形,蛋重应在55~65 g,沙壳蛋和畸形蛋的比例不能超过2%等。
  在SPF种蛋到达后,可随机挑选1%的种蛋按照国家规定的SPF鸡微生物监测标准进行检测,或委托有资质的实验室对种蛋进行全方位的质量检测。一旦发现问题,及时处理和解决。
  2 提供科学合理的饲料营养
  禽类胚胎的发育在体外发生,其发育期的营养则主要由种蛋内的物质提供,故种蛋内充足的营养蓄积是确保鸡胚发育良好的关键。SPF种鸡只有饲喂优质、营养均衡的全价饲料,才能保证生产出营养充分的高质量SPF种蛋。
  如果饲料中,某种营养成分缺乏或不平衡,就会导致SPF种鸡营养不良,进而使种蛋缺乏鸡胚发育所必须的营养物质,从而对鸡胚的发育造成伤害。饲料中铜、铁、锰、锌、硒等矿物质如果缺乏,会导致鸡胚的畸形率增多,并且孵化后期死亡鸡胚增多;饲料中如果缺乏维生素,对种蛋的孵化影响更大。如果饲料中缺乏维生素A和维生素D,不仅导致种蛋的合格率严重下降,而且可以导致种蛋孵化率下降约10%,出雏率降低约20%;如果维生素B和维生素E缺乏,SPF公鸡精液质量差,母鸡的产蛋率降低约10%,并且导致受精率降低约20%,还会导致胚胎畸形、异位或孵化过程中大量死亡。因此,在整个SPF鸡饲养周期内,要特别注意饲料维生素A、维生素B族、微量元素锌、碘、锰、硒及矿物质钙、磷等的供给与平衡,满足SPF鸡在不同饲养阶段的营养需求。
  必须关注的是:SPF鸡饲料需要经高压灭菌(121 ℃、20 min),而经过灭菌的饲料通常会造成部分氨基酸和大部分维生素的损失。因此,应注意及时补充或改变饲料配方,在饲料高压灭菌前添加一定的保险剂量。一般情况下,经过高压灭菌的饲料,其粗蛋白的损失量约为4.2%,微量元素和矿物质变化不大;但高压灭菌通常对维生素损失较大,其中以维生素A、维生素D、维生素E及维生素B族元素损失较大,一般在10%~60%。
  为此,可根据SPF鸡的生物学特性和饲料高压灭菌导致营养易损耗的特点,设计专门的饲料配方,不仅要保证饲料中适宜的能量和蛋白质,还要确保充足的微量元素和维生素。在日常饲养管理中可通过添加一定保险剂量(比标准提高10%~30%)的氨基酸和维生素进行补充,以便为SPF鸡提供营养较为全面的优质饲料;其次,可改变饲料的灭菌方式,一般情况下,辐照灭菌对饲料的影响相对较小。无论哪种方式对饲料进行灭菌,均应进行对饲料的无菌检验和营养成分检测,且经无菌检测合格后方可使用,以确保SPF鸡不被微生物污染。
  3 SPF种蛋的收集和消毒
  在SPF鸡饲养过程中,应及时收集种蛋,至少每两小时收集一次,该方法不仅可将种蛋受到鸡粪污染的可能性降至最小,还可以减少种蛋的破损率。种蛋收集后,应立即进行表面的清洁和消毒,去除鸡蛋表面的粪便。每天收集的种蛋一般应集中表面消毒,可采用表面消毒剂、甲醛和高锰酸钾熏蒸等方法进行消毒。进行甲醛和高锰酸钾气体熏蒸消毒时,应在相对密封的环境进行,具体做法是每立方米空间用高锰酸钾14 g加28 mL甲醛溶液熏蒸20 min。熏蒸种蛋时,熏蒸室应保持室温24 ℃以上,相对湿度保持在75%以上,效果最佳。
  4 贮存和筛选
  4.1 种蛋的贮存
  SPF种蛋一般贮存不超过7 d,以一周内为宜,3~5 d效果为最好;超过8 d,则鸡胚的胚胎活力降低,孵化时间延长,孵化率降低。当SPF种蛋贮存3 d以内时,应将种蛋的大头冲上、小头向下放置,这样有利于提高孵化率并缩短孵化时间;当种蛋贮存时间超过7 d时,应将小头向上放置,为避免胚盘与壳膜发生粘连,最好每天翻蛋1~2次,每次翻蛋角度为45 °。超过2周以上的SPF蛋不宜用作孵化。
  温度与湿度:1~3 d最适宜存放温度为17~18 ℃;7 d以內为15~17 ℃;超过一周以上贮存温度为10~12 ℃。种蛋的保存最佳湿度为75%~80%之间,湿度太低,蛋内水分蒸发过快,孵化率降低;湿度太高,蛋表面易产生霉菌,降低孵化率。
  4.2 种蛋的筛选
  SPF种蛋应选择蛋壳细致均匀,厚薄适中,剔除软皮蛋、破蛋、沙壳蛋、畸形蛋等。种蛋一般以50~65 g之间为宜,蛋的形状为椭圆型,蛋形指数在0.7~0.8之间(横径,纵径)。如果种蛋大小不一,可按种鸡蛋大小分批入孵,确保一致性。
  要选择蛋壳清洁、没有粪便或脏物污染的SPF种蛋。如果蛋壳脏污,容易被细菌污染,引起腐败,同时还会堵塞蛋壳的气孔,影响气体交换,使胚胎得不到应有的O2,排不出CO2,继而造成死胚增加,孵化率降低。   5 孵化技术要点
  5.1 孵化前的消毒准备
  孵化前要对孵化室、孵化设备和附属设备要进行彻底的清洗、消毒和熏蒸。孵化前要检查孵化室是否严密、有无破损、调试孵化器;检查温度、湿度等显示是否正常,并进行温度校准;检查备用电机发电是否能正常发电等,以及最后采样检测微生物指标是否达到万级净化标准。只有当环境达到净化指标时,方可上孵。
  5.2 合适的孵化温度和湿度
  温度和湿度是SPF鸡胚孵化最重要的条件,只有在适宜的温度和湿度下,才能保证胚胎的正常物质代谢和生长发育,获得健康的鸡胚。
  5.2.1 温度 种蛋从库运出后,一般情况下,种蛋的表面温度较低,可在入孵前12 h装盘并移室(20~25 ℃最佳),12~24 h后开机上孵。孵化时种蛋要大头向上摆放,因鸡胚绝大多数都在靠近气室的一端,气室大多在鸡蛋的大头,这样有利于提高孵化率。在孵化过程中要做到看胚施温。一般情况下,变温孵化效果最好,即1~5 d温度为38.2~38.3 ℃,6~12 d为38.0~37.9 ℃,13~18 d为37.4~37.8 ℃,19~21 d为37.0~37.3 ℃。如果鸡胚孵化的温度过高或偏低,均会缩短或延长孵化期,使鸡胚的死亡率增加。在孵化过程中,应注意监测孵化期内部的温差,包括孵化器内的上、下、左、右等,其温差不能太大,应经常检查并校准温度,必要时可进行位置互换。
  5.2.2 湿度 若想孵化成功,控制好湿度是关键。孵化期湿度控制原则是两头高、中间低。孵化前期(1~7 d)孵化器内湿度为60%~70%,孵化中期(8~18 d)孵化器内湿度50%~55%,孵化后期(19~21 d),小鸡即将出壳,为防止雏鸡绒毛与蛋壳粘连,应给予较高的相对湿度,一般可提高到70%~75%。孵化室、出雏室的相对湿度保持在65%~70%之间。当湿度过低时,胚胎生长发育加快,蛋内水分蒸发过快,气室增大,不利于CO2的排出和O2的吸收;同时,啄壳部下降,雏鸡干瘪瘦小,绒毛干燥、发焦,有时粘壳;采取的针对性措施:可以在孵化器内增加水盘,增加湿度。当湿度过高时,蛋内的水分不能正常蒸发,延长雏鸡出壳时间,雏鸡弱,腹部大、绒毛粘连,严重影响鸡胚的孵化率和出雏率;采取的针对性措施:加强通风使水气散发。
  疫苗生产厂家孵化SPF鸡胚时,前面与上相同,但接种疫苗病毒后,一般应固定在37℃,湿度控制在50%~60%,不允许翻蛋。通常以尿囊液或鸡胚收获量最大为基本原则。
  5.3 通风
  胚胎在发育过程中,需要不断地吸收O2和排出CO2,为保持SPF鸡胚胎的正常气体代谢,必须供给充足的新鲜的O2。通风的目的是提供O2,排出CO2,使孵化室内温度均匀,促进胚胎散热,防止鸡胚的自温超温。因此,通风换气十分重要。一般情况下,孵化机内CO2必须要控制在0.5%以内。判断通风是否合理,可观察加热指示灯,当恒温与加热频繁交替时,说明通风正常。
  5.4 翻蛋
  孵化过程中翻蛋可使胚胎受热均匀,有利于胚胎发育,避免胚胎和壳膜粘连在一起而造成鸡胚死亡,有利于提高孵化率。一般每2 h翻蛋一次,翻蛋的角度以水平位置前俯后仰45 °为宜。孵化18 d后移入出雏器即可以停止翻蛋,以利于雏鸡啄壳出雏。
  5.5 晾蛋
  晾蛋的目的在于驱散孵化机内的余热,让鸡胚胎得到更多的新鲜空气,促进胚胎发育。尤其是孵化后期胚胎代谢加强,为防止胚体产热超温,传统的孵化通常需要适当凉蛋。鉴于目前的孵化器功能比较完善,设计更加合理,该环节可以忽略。
  5.6 照蛋
  照蛋的目的在于观察胚胎发育是否正常。如发现不正常,可及时调整孵化条件,以便获得良好的孵化效果。整个孵化周期,一般照蛋3次,第一次在5~6 d进行,剔出无精蛋、死精蛋;第二次在11 d进行,挑选出中途死胚,以免孵化时变质炸裂;第三次在移盘时进行,一边落盘一边验蛋,剔出后期死胚。在每次照蛋的同时,检查鸡胚发育情况,并及时做好“因胎施温”。
  6 其他
  6.1 孵化室温度
  孵化室的温度控制在22~26 ℃之间效果最佳。当孵化室温度太低时,会影响孵化器内的温度;当孵化室温度太高时,会不利于孵化器内胚胎的散热,对鸡胚后期的发育不利。
  6.2 环境卫生
  加強环境卫生管理,是提高鸡胚孵化率的关键之一。每天应对孵化室的地面进行清扫,对墙壁进行擦拭和消毒。落盘后对孵化室地面、蛋盘、蛋车等应进行彻底清刷,再用消毒药喷洒消毒。
  6.3 人员管理
  孵化室工作人员最好进行隔离和封闭管理,进入孵化室应按要求进行洗澡、换鞋和更衣,进入孵化室需穿经高压灭菌的超净连体工作服,佩戴口罩,手套,接触种蛋、鸡雏前用消毒液进行洗手消毒,严禁外来人员进入。
  7 小结
  SPF蛋的孵化受到诸多因素的影响,特别是与孵化期间的温度、湿度、翻蛋和通风等孵化器密切相关。只有加强SPF鸡日常饲养管理并且掌握每一步关键技术,才能提高SPF蛋的孵化率。
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