探究移植人脐带沃顿胶(Wharton's jelly, WJ)对脑外伤(traumatic brain injury, TBI)小鼠炎症反应和抑郁情绪的影响。
方法分离与培养脐带沃顿胶,流式细胞仪鉴定第三代脐带间充质干细胞的细胞表型。采用改良式自由落体脑外伤模型,将实验小鼠随机(随机数字法)分为两组:脑损伤+生理盐水处理组(Veh组),脑损伤+WJ移植组(WJ组)。术后3 d,干湿称重法检测小鼠损伤侧脑含水量,Elisa试剂盒检测炎症因子IL-1β和TNF-α的表达,HEt染色检测损伤部位活性氧的积累,GFAP免疫荧光染色检测星形胶质细胞的表达,Iba1和CD68免疫荧光染色检测小胶质细胞的表达;术后28 d,神经功能缺损评分评价小鼠运动功能,糖水偏好实验、悬尾实验和强迫游泳实验评价小鼠的认知和情绪状况。所得数据使用SPSS 21.0软件,以均数±标准差(
±s)表示,不同时间点的比较采用重复测量设计的两因素ANOVA分析。
与Veh组相比,WJ移植组小鼠神经功能缺损评分降低[1 d:(14.8±1.169和15.2±1.472),3 d:(11.0±1.414和13.5±1.225),7 d:(9.5±1.517和12.0±1.549),14 d:(7.7±0.816和10.5±1.643),21 d:(6.5±0.547和9.0±1.265),28 d:(5.3±0.816和7.8±1.169),P<0.05],糖水偏嗜度升高[(64.56±2.279)%和(54.49±1.505)%,P=0.004],悬尾实验不动时间减少[(115.7±4.660)s和(144.7±5.493)s,P<0.01],强迫游泳实验悬浮时间降低[(215.8±5.003)s和(260.3±4.558)s,P=0.002],脑含水量降低[(75.58±1.559)%和(84.48±1.802)%,P=0.004],炎症因子IL-1β和TNF-α水平均明显降低[(44.429±3.422)ng/mL和(658.712±43.175)ng/mL,(70.717±4.124)ng/mL和(1 043.118±56.813)ng/mL,P=0.000 6和0.000 3)],损伤区域ROS含量减少[(2 151±406.287)和(3 687±380.466),P=0.020],活化的星形胶质细胞荧光强度明显降低[(1 658±312.912)和(2 906±431.591),P=0.041],小胶质细胞的数量减少[(15.167±1.249)个和(20.833±2.212)个,P=0.049],活化的小胶质细胞同样减少[(13.500±2.094)个和(38.833±3.301)个,P<0.01]。
结论小鼠脑外伤后,人脐带沃顿胶对小鼠的抑郁情绪和炎症反应有明显改善作用。