槐耳清膏抑制人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞生长和转移及其作用机制研究

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探讨槐耳清膏对人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞生长和转移的抑制作用及其潜在的作用机制.采用细胞增殖毒性试验(MTT法)检测槐耳清膏对NCI-H1299细胞增殖的影响.采用流式细胞术检测槐耳清膏给药后对NCI-H1299细胞凋亡率、细胞周期以及细胞内活性氧(ROS)水平的影响.采用细胞划痕试验研究槐耳清膏给药后对NCI-H1299细胞迁移能力的影响.此外,借助免疫印迹法检测槐耳清膏给药后与凋亡和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程相关的蛋白以及MAPK信号通路中的关键蛋白表达水平的变化.研究结果显示,槐耳清膏能够抑制人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞的增殖,而且诱导细胞周期阻滞在S期.槐耳清膏能够通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达促进NCI-H1299细胞凋亡的发生.此外,槐耳清膏给药能够升高NCI-H1299细胞内ROS的含量从而诱导细胞铁死亡的发生.EMT在癌症转移中起着重要作用.槐耳清膏给药后能够降低NCI-H1299细胞的迁移能力,并且能够下调间质标志物TCF8/ZEB1,N-cadherin,β-catenin的蛋白水平进而抑制NCI-H1299细胞EMT进程.该研究还揭示在人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞中槐耳清膏能够抑制MAPK信号通路,这可能是槐耳清膏抑制NCI-H1299细胞生长和转移的机制之一.该项工作为槐耳抗肺癌作用研究提供了新的内容,也为槐耳临床治疗肺癌提供了新的理论依据,对后续深入研究槐耳抗肿瘤作用机制具有一定的参考意义.
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