【摘 要】
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目的 观察下调哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）基因表达对人肝癌细胞SMMC-7721热疗敏感性的影响并初步探讨其作用机制。方法通过脂质体介导mTOR反义真核表达载体转染SMMC-7721细胞，分别采用RT—PCR和Western blot技术检测转染后roTOR基因mRNA及蛋白表达。SMMC-7721细胞经转染后给予热疗处理，采用CCK-8法检测细胞增殖活性，采用平板克隆实验检测克隆形成率，采
【机 构】
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中山大学附属第三医院岭南医院普通外科,广州510530,中山大学附属第三医院岭南医院肝移植科,广州510530,中山大学附属第三医院岭南医院普通外科,广州510530,中山大学附属第三医院岭南医院普通
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目的 观察下调哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）基因表达对人肝癌细胞SMMC-7721热疗敏感性的影响并初步探讨其作用机制。方法通过脂质体介导mTOR反义真核表达载体转染SMMC-7721细胞，分别采用RT—PCR和Western blot技术检测转染后roTOR基因mRNA及蛋白表达。SMMC-7721细胞经转染后给予热疗处理，采用CCK-8法检测细胞增殖活性，采用平板克隆实验检测克隆形成率，采用细胞划痕实验检测迁移能力，采用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化情况。结果SMMC-7721细胞转染后其mTOR基因mRNA表达（0．23±0．01）及蛋白表达（0．31±0．02）均明显降低（P〈0．05），提示反义载体能有效下调SMMC-7721细胞mTOR基因表达。SMMC-7721细胞经转染后给予热疗处理，发现细胞增殖活性、克隆形成能力及细胞迁移能力均明显降低（P〈0．05）。通过流式细胞仪检测发现，实验组SMMC-7721细胞经热疗后其凋亡率[（52．27±3．72）％]较阴性对照组凋亡率[（28．93±2．51）％]明显增高，其细胞周期呈现S期比例增加（P〈0．05）及生长阻滞现象。结论下调mTOR基因表达能提高人肝癌细胞SMMC-7721的热疗敏感性，其作用机制可能与诱导细胞凋亡及S期生长阻滞有关。
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