【摘 要】
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目的:探讨低氧下K562细胞向红系分化过程中GATA-1蛋白的表达变化及GATA-1如何通过上调miR-451a表达抑制14-3-3ζ的表达调控红系分化.方法:将K562细胞分为常氧组及低氧组,经氯
【机 构】
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青海大学医学院生物化学教研室,青海西宁810000
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目的:探讨低氧下K562细胞向红系分化过程中GATA-1蛋白的表达变化及GATA-1如何通过上调miR-451a表达抑制14-3-3ζ的表达调控红系分化.方法:将K562细胞分为常氧组及低氧组,经氯化血红素(hemin)诱导96 h后,检测联苯胺染色阳性细胞率、γ-globin的mRNA表达以及CD235a的表达等相应红系分化指标,验证模型是否复制成功;采用Western blot及qRT-PCR检测GATA-1蛋白和miR-451a在上述2组中的表达变化及过表达GATA-1后miR-451a的表达变化;将常氧组和低氧组细胞分别分为阴性对照组(NC组)及miR-451a过表达组,结合相应红系分化指标共同判断4组细胞红系分化程度;过表达miR-451a后通过Western blot检测14-3-3ζ的表达变化.结果:低氧下K562细胞诱导96 h后联苯胺染色阳性细胞率、γ-globin的mRNA表达及CD235a的表达均显著高于0 h(P＜0.05),这提示,低氧下K562细胞红系分化模型复制成功.低氧组GATA-1蛋白及miR-451a的表达水平均显著高于常氧组(P＜0.05).低氧下过表达GATA-1后,miR-451a的表达水平较NC组明显升高(P＜0.05).低氧下过表达miR-451a后,联苯胺染色阳性细胞率、γ-globin的mRNA表达水平及CD235a的表达均明显高于NC组(P＜0.05).14-3-3ζ的蛋白表达水平检测结果显示,低氧下miR-451a过表达组14-3-3ζ的表达水平低于NC组(P＜0.05).结论:低氧条件可显著提高GATA-1蛋白的表达水平,GATA-1表达的升高可上调miR-451a,进而抑制14-3-3ζ的蛋白表达,阻碍K562细胞红系分化模型中的细胞增殖过程,发挥促红系分化的作用.
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