【摘 要】
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目的:探讨肿瘤蛋白53调控的细胞凋亡抑制剂1(TRIAP1)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞顺铂(DDP)敏感性的影响及作用机制.方法:常规培养OSCC细胞系Cal-27细胞,采用分次DDP诱导递增法建立DDP耐药OSCC细胞株(DDP-Cal-27),MTS检测DDP-Cal-27细胞对DDP的敏感性,Western blot检测DDP-Cal-27细胞中TRIAP1的表达.并采用TRIAP1干扰慢病毒构建TRIAP1敲低的DDP耐药OSCC细胞株(sh-TRIAP1)及对照无关序列感染的DDP耐药OS
【机 构】
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空军军医大学第三附属医院急诊与综合临床科,陕西 西安 710032;陕西省肿瘤医院头颈肿瘤科,陕西 西安 710061
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目的:探讨肿瘤蛋白53调控的细胞凋亡抑制剂1(TRIAP1)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞顺铂(DDP)敏感性的影响及作用机制.方法:常规培养OSCC细胞系Cal-27细胞,采用分次DDP诱导递增法建立DDP耐药OSCC细胞株(DDP-Cal-27),MTS检测DDP-Cal-27细胞对DDP的敏感性,Western blot检测DDP-Cal-27细胞中TRIAP1的表达.并采用TRIAP1干扰慢病毒构建TRIAP1敲低的DDP耐药OSCC细胞株(sh-TRIAP1)及对照无关序列感染的DDP耐药OSCC细胞株(sh-NC),Western blot检测sh-TRIAP1细胞中TRIAP1的表达,MTS检测sh-TRIAP1细胞对DDP的敏感性.sh-NC组和sh-TRIAP1组细胞经DDP处理后,平板克隆检测各组细胞平板克隆形成能力,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,Western blot检测各组细胞中凋亡蛋白Caspase 9和Caspase 3蛋白的表达,耐药相关蛋白P-gp和ABCG2的表达.结果:与Cal-27细胞相比,DDP-Cal-27细胞对DDP的敏感性降低,DDP-Cal-27细胞中TRIAP1的表达增加(均P<0.05).TRIAP1干扰慢病毒感染DDP-Cal-27细胞后,与sh-NC组相比,sh-TRIAP1组细胞中TRIAP1的表达降低和对DDP的敏感性增强(均P<0.05).与sh-NC组相比,DDP处理的sh-TRIAP1组细胞平板克隆形成能力降低,细胞凋亡率增加(均P<0.05),sh-TRIAP1组细胞中凋亡蛋白Caspase 9和Caspase 3蛋白的表达增加,耐药相关蛋白P-gp和ABCG2表达降低(P<0.05).结论:TRIAP1可能通过调控凋亡相关蛋白增加OSCC细胞DDP敏感性,是治疗OSCC的潜在靶点.
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