【摘 要】
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目的通过杆状病毒-昆虫细胞表达体系,获得纯重组人博卡病毒(HBoV)病毒蛋白2(VP2)病毒样颗粒,为HBoV的血清学检测方法的建立及疫苗研究提供实验基础。方法采用含有HBoV VP2基
【机 构】
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湖南省人民医院检验科,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
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目的通过杆状病毒-昆虫细胞表达体系,获得纯重组人博卡病毒(HBoV)病毒蛋白2(VP2)病毒样颗粒,为HBoV的血清学检测方法的建立及疫苗研究提供实验基础。方法采用含有HBoV VP2基因的重组杆状病毒感染草地夜蛾9(SF9)细胞,一定时间后收集细胞及上清,经氯化铯(CsCl)不连续密度梯度超速离心后,获得高纯度人博卡病毒VP2病毒样颗粒。SDS-PAGE鉴定目的蛋白的纯度和分子量,透射电镜观察病毒样颗粒结构,Western blotting鉴定蛋白的抗原性。结果 SDS-PAGE结果显示该研究获得的重组HBoV VP2病毒样颗粒分子量约为60kD,无明显杂带;该研究获得的HBoV VP2病毒样颗粒能和鼠抗人博卡病毒VP2多克隆抗体结合;电镜下HBoV VP2病毒样颗粒为对称正二十面体结构,直径约为20~25 nm。结论该研究成功获得高纯度的重组HBoV VP2病毒样颗粒,可用于人博卡病毒感染的血清学及免疫学研究。
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