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【摘要】 目的:分析EDTA-K2抗凝血对30余项生化项目检验结果的影响,并分析其原因及其校正。方法:对同时抽取的50例EDTA-K2抗凝血标本与血清标本在AU2700生化分析仪进行TBIL、DBIL、SP、A、ALT、AST、TBA、ALP、MAO、ADA、BU、Cr、UA、P、Mg、GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C、APOA1、APOB、IMA、CK、CK-MB、LDH、α-HBDA、CRP、ASO、RF、AMS、IgG、IgM、IgA、C3、C4等项目测定,对大部分生化项目进行直线回归进行相关系数分析。结果:两组标本生化项目中除DBIL、Mg、ASO、RF、ALP、IMA比较差异有统计学意义外,其他项目无统计学意义;相关性良好(r2>0.80)的生化项目有TBIL、BU、Cr、P、GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C、APOA1、APOB、CK、CK-MB、α-HBDA、CRP、ASO、AMS、IgG、IgM、IgA、C3、C4。结论:在血清标本不足时或血清标本存在溶血时,可用多余的血常规标本(EDTA-K2抗凝血)经离心后,替代血清标本用于(除TBIL、LDH、α-HBDA、P、Mg、UA、ASO、RF、ALP、IMA外)生化项目的检测,且结果可用于临床分析。
【关键词】 EDTA-K2; 生化检验; AU2700生化分析仪; 直线回归; 相关系数r
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2015.07.026
临床生化检验中,常常遇到生化标本太少或者存在溶血,影响生化检验结果准确性、及时性;同时部分患者(新生儿、儿科患者、烧伤患者、ICU室患者)重新采血存在困难,而这类患者往住是血常规检测与生化检测基本上是同步进行的,笔者尝试用EDTA-K2抗凝血经离心后取血浆替代血清标本进行常用生化项目检测,旨在分析EDTA-K2抗凝血对生化检验结果的影响,分析原因并提出相关的处理措施,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料及试剂 无抗凝剂管或促凝管、EDTA-K2抗凝管,由湖南浏阳医用仪具厂提供。检测项目原理及试剂:总胆红素(TBIL,氧化法)、直接胆红素(DBIL,氧化法)、总蛋白(SP)、白蛋白(A)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA,循环酶法)、尿素(BU,酶法)、肌酐(Cr,苦味酸法)、尿酸(UA,酶法)、血糖(GLU,己糖己酶法)、血淀粉酶(AMS)、磷(P)、镁(Mg)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、载脂蛋白A1(APOA1)、载脂蛋白B(APOB)等项目由山东3V生物科技有限公司生产,C反应蛋白(CRP)、抗O(ASO)、RF、IgG、IgM、IgA、C3、C4均为永和阳光生物科技有限公司生产。缺血修饰白蛋白(IMA)由长沙熙康生物科技有限公司生产。
1.2 仪器 AU2700全自动生化分析仪,长沙湘智TDZ5-WS低速离心机。
1.3 标本来源 本院住院部同一患者同时采取血常规及血生化标本,其中血常规足够量及肉眼未见小凝块,所有标本经离心后无明显溶血及乳糜状。
1.4 质控物 朗道质控物,批号:ZX21511N。
1.5 方法 先用朗道质控物进行测定,所有项目均在控,进行下一步分析。取同一患者的血常规剩余血及血生化标本,经离心后取血浆或血清在AU2700生化析仪上进行相关生化项目分析,所得结果进行统计学分析。
1.6 统计学处理 使用SPSS 13.0统计学软件对本组数据进行分析,P<0.05为差异有统计学意义,同时对绝大多数生化项目进行直线回归及相关性分析。
2 结果
两组标本生化项目中除DBIL、Mg、ASO、RF、ALP、IMA比较差异有统计学意义外,其他项目无统计学意义;直线回归方程及相关性良好(r2>0.80)的生化项目有TBIL、BU、Cr、P、GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C、APOA1、APOB、CK、CK-MB、α-HBDA、CRP、ASO、AMS、IgG、IgM、IgA、C3、C4。结果见表1。对结果相差太大的生化项目(ALP、IMA)不进行直线回归方程及相关性分析,但分析其原因。
3 讨论
本实验研究发现,EDTA-K2抗凝血浆组与血清组在肝、肾功能、血糖血脂、心肌酶、免疫球蛋白等多数项目比较差异无统计学意义,与有关文献[1-3]略有差异,笔者认为有两个方面的原因:其一是笔者所采用的标本是住院患者,来源广泛且高、低值相差大,而有关文献标本来源是体检者,结果在一定范围内波动,故统计学处理方面会有差异;其二可能存在不一样厂家试剂或方法学不一致。
EDTA-K2抗凝原理是EDTA-K2中的EDTA成分可与Ca2+形成配位化合物,而Ca2+是内、外凝血途经的必需因子,所以血液不能凝固,从而起到抗凝作用,因此EDTA-K2抗凝血浆组中的钙、镁含量下降,与文献[1-4]报道一致。
此次实验中发现EDTA-K2抗凝血浆组ALP的检测值明显低于血清值,甚至有个别检测值为负数或零,呈明显的抑制状态,文献[5]认为这主要因为ALP检测中的中间产物对硝基苯酚需要在碱性溶液中转变为醌式结构,呈现较深的黄色而进行比色分析,而EDTA在抗凝过程中产生了氢离子,而使溶液成中性甚至酸性,故检测受到抑制;EDTA-K2抗凝血浆组IMA的检测值明显高于血清值,这是否与EDTA-K2中的某些成分能促进缺血修饰白蛋白检测反应,有待进一步验证。
临床护理工作中,多个项目检测抽血时,一般会按照如下顺序进行抽血:凝血功能→血常规→血生化→免疫等[6],对于某些患者(新生儿、儿科患者、大面积烧伤患者等)会存在抽血困难,抽取一、二管血后,适当挤压抽完后面部分项目(生化、免疫等),往往会造成轻度溶血,而溶血标本对部分生化项目检测有影响[7-10]。
【关键词】 EDTA-K2; 生化检验; AU2700生化分析仪; 直线回归; 相关系数r
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2015.07.026
临床生化检验中,常常遇到生化标本太少或者存在溶血,影响生化检验结果准确性、及时性;同时部分患者(新生儿、儿科患者、烧伤患者、ICU室患者)重新采血存在困难,而这类患者往住是血常规检测与生化检测基本上是同步进行的,笔者尝试用EDTA-K2抗凝血经离心后取血浆替代血清标本进行常用生化项目检测,旨在分析EDTA-K2抗凝血对生化检验结果的影响,分析原因并提出相关的处理措施,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料及试剂 无抗凝剂管或促凝管、EDTA-K2抗凝管,由湖南浏阳医用仪具厂提供。检测项目原理及试剂:总胆红素(TBIL,氧化法)、直接胆红素(DBIL,氧化法)、总蛋白(SP)、白蛋白(A)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA,循环酶法)、尿素(BU,酶法)、肌酐(Cr,苦味酸法)、尿酸(UA,酶法)、血糖(GLU,己糖己酶法)、血淀粉酶(AMS)、磷(P)、镁(Mg)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、载脂蛋白A1(APOA1)、载脂蛋白B(APOB)等项目由山东3V生物科技有限公司生产,C反应蛋白(CRP)、抗O(ASO)、RF、IgG、IgM、IgA、C3、C4均为永和阳光生物科技有限公司生产。缺血修饰白蛋白(IMA)由长沙熙康生物科技有限公司生产。
1.2 仪器 AU2700全自动生化分析仪,长沙湘智TDZ5-WS低速离心机。
1.3 标本来源 本院住院部同一患者同时采取血常规及血生化标本,其中血常规足够量及肉眼未见小凝块,所有标本经离心后无明显溶血及乳糜状。
1.4 质控物 朗道质控物,批号:ZX21511N。
1.5 方法 先用朗道质控物进行测定,所有项目均在控,进行下一步分析。取同一患者的血常规剩余血及血生化标本,经离心后取血浆或血清在AU2700生化析仪上进行相关生化项目分析,所得结果进行统计学分析。
1.6 统计学处理 使用SPSS 13.0统计学软件对本组数据进行分析,P<0.05为差异有统计学意义,同时对绝大多数生化项目进行直线回归及相关性分析。
2 结果
两组标本生化项目中除DBIL、Mg、ASO、RF、ALP、IMA比较差异有统计学意义外,其他项目无统计学意义;直线回归方程及相关性良好(r2>0.80)的生化项目有TBIL、BU、Cr、P、GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C、APOA1、APOB、CK、CK-MB、α-HBDA、CRP、ASO、AMS、IgG、IgM、IgA、C3、C4。结果见表1。对结果相差太大的生化项目(ALP、IMA)不进行直线回归方程及相关性分析,但分析其原因。
3 讨论
本实验研究发现,EDTA-K2抗凝血浆组与血清组在肝、肾功能、血糖血脂、心肌酶、免疫球蛋白等多数项目比较差异无统计学意义,与有关文献[1-3]略有差异,笔者认为有两个方面的原因:其一是笔者所采用的标本是住院患者,来源广泛且高、低值相差大,而有关文献标本来源是体检者,结果在一定范围内波动,故统计学处理方面会有差异;其二可能存在不一样厂家试剂或方法学不一致。
EDTA-K2抗凝原理是EDTA-K2中的EDTA成分可与Ca2+形成配位化合物,而Ca2+是内、外凝血途经的必需因子,所以血液不能凝固,从而起到抗凝作用,因此EDTA-K2抗凝血浆组中的钙、镁含量下降,与文献[1-4]报道一致。
此次实验中发现EDTA-K2抗凝血浆组ALP的检测值明显低于血清值,甚至有个别检测值为负数或零,呈明显的抑制状态,文献[5]认为这主要因为ALP检测中的中间产物对硝基苯酚需要在碱性溶液中转变为醌式结构,呈现较深的黄色而进行比色分析,而EDTA在抗凝过程中产生了氢离子,而使溶液成中性甚至酸性,故检测受到抑制;EDTA-K2抗凝血浆组IMA的检测值明显高于血清值,这是否与EDTA-K2中的某些成分能促进缺血修饰白蛋白检测反应,有待进一步验证。
临床护理工作中,多个项目检测抽血时,一般会按照如下顺序进行抽血:凝血功能→血常规→血生化→免疫等[6],对于某些患者(新生儿、儿科患者、大面积烧伤患者等)会存在抽血困难,抽取一、二管血后,适当挤压抽完后面部分项目(生化、免疫等),往往会造成轻度溶血,而溶血标本对部分生化项目检测有影响[7-10]。