【摘 要】
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为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物，本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列（IFN2a）合成模板，通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游，并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中，获得重组质粒pCold-TF-CaIFN2a-Fe。转化BL21后用异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），蛋白免疫印
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为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物，本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列（IFN2a）合成模板，通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游，并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中，获得重组质粒pCold-TF-CaIFN2a-Fe。转化BL21后用异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），蛋白免疫印迹（Western blot）鉴定，获得约89 kD的可溶性重组目的蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后，使用犬肾细胞/水疱疹性口炎病毒（MDCK/VSV）微量细胞病变抑制法检测抗病毒活性，效价确定为8×104 IU/mg，显示出良好的应用前景。
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