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摘 要：瓜类细菌性果斑病（Bacterial fruit blotch，BFB）是一种检疫性病害，其严重危害西瓜产业的健康发展。采用BF配方肥（含氮、锌、锰、钾）加4种杀菌剂硫酸铜、醋酸铜、可杀得叁千、过氧乙酸，配制成不同的包衣成分，对带BFB西瓜种子进行处理，探究了不同包衣成分对西瓜带BFB种子在幼苗期的防治效果。结果表明，在发病初期，BF+2 g/L硫酸铜处理带BFB种子在幼苗期的防治效果最好，防治效果为96.03%;在发病末期，BF+1 g/L醋酸铜处理带BFB种子在幼苗期的防治效果最好，防治效果为87.18%。从幼苗生长指标来看，BF+2 g/L硫酸铜处理幼苗茎粗、第一真叶长×宽显著高于对照，BF+5 g/L硫酸铜处理幼苗株高最高;第一真叶叶绿素含量各处理组之间没有显著性差异。
关键词：包衣成分;西瓜;细菌性果斑病;幼苗;防治效果
细菌性果斑病（BFB）是一种严重为害葫芦科植物的世界性病害[1-2]。BFB在持续湿度大的情况下，菌脓从叶片流落在果实上，致使果实形成病斑，失去经济价值，给瓜农带来严重的经济损失，被瓜农称为西瓜、甜瓜的“癌症”[3]。BFB是一种典型的种传性病害，如果不加强种子检测和灭菌处理，病原菌会随着种子大面积传播，对整个西瓜、甜瓜种植行业产生巨大危害。
目前，针对BFB的种子处理方法主要有物理[4]、化学[5]、生物[6]等。化学方法主要是采用杀菌剂来消灭病原菌，包括铜制剂、抗生素等。前人研究发现，铜制剂杀菌剂是一种保护型杀菌剂，具有杀菌效率高、药效期长、病菌难以产生抗药性及经济环保等优点[7]。刘克贞等研究发现，过氧乙酸对BFB有一定防效。对于细菌性果斑病的防治是当下研究的热点，但大多采用单一药剂处理，针对BFB的复合药剂处理研究较少[8]。
前人[9-11]研究表明，一定浓度氮、锌、锰、钾肥可以促进植物幼苗的生长，柠檬酸可以减轻重金属盐的毒害[12]。本试验以BF配方肥（氮、锌、锰、钾）为基础，加入4种殺菌剂，分别为硫酸铜（CuSO4）、醋酸铜（（CH3COOH）2Cu）、可杀得叁千、过氧乙酸（CH3COOOH），配制成不同的西瓜种子包衣成分，从中筛选出能够对西瓜BFB产生防治效果的包衣成分，为西瓜BFB的防治提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试种子
供试西瓜品种为“西域四号”，由新疆西域种业有限公司提供，于2019年生产。供试西瓜细菌性果斑病病原菌由新疆农业大学林学与园艺学院植物生理学实验室提供。
1.1.2 供试药剂
供试药剂有BF配方肥（含氮、锌、锰、钾，由新疆农业大学林学与园艺学院园艺系提供）、KH2PO4（天津市光复科技发展有限公司生产，分析纯）、柠檬酸（天津市光复科技发展有限公司生产，分析纯）、（NH4）2SO4（天津市致远化学试剂有限公司生产，分析纯）、ZnSO4（天津市致远化学试剂有限公司生产，分析纯）、MnSO4（天津市北联精细化学品开发有限公司生产，分析纯）、CuSO4（天津市致远化学试剂有限公司生产，分析纯）、醋酸铜（天津市福晨化学试剂厂生产，分析纯）、46%可杀得叁千（美国杜邦公司生产）、CH3COOOH（天津市致远化学试剂有限公司生产，浓度≥15%）。
1.2 试验方法
1.2.1 试验设计
本试验以BF配方肥为基础，加入CuSO4、（CH3COOH）2Cu、可杀得叁千、CH3COOOH，配制成种子包衣成分。其中CuSO4、（CH3COOH）2Cu、可杀得叁千、CH3COOOH各设置3个浓度梯度，共计12个处理组，以清水处理为CK。BF配方肥药剂的浓度为4 g/L（NH4）2SO4 、0.75 g/L ZnSO4、0.5 g/L MnSO4、4.5 g/L KH2PO4、8 g/L柠檬酸。添加药剂浓度及包衣成分编号见表1。
1.2.2 细菌性果斑病病原菌活化及培养
病原菌活化用KMB固体培养基（20 g胰蛋白胨、1.5 g K2HPO4、1.5 g MgSO4·7H2O、10 g甘油、10 g琼脂粉，定容1 L，pH值7.2），病原菌活化后于28 ℃恒温培养箱培养24 h，挑取单菌落接种NB（5 g/L胰蛋白胨、3 g/L牛肉粉，pH值7.2）于液体培养基中，在220 r/min、28 ℃条件下培养16～18 h。用分光光度计测定菌悬液的OD值，并用灭菌水将菌悬液浓度调到OD600为0.2～0.5备用[13]。
1.2.3 种子处理
试验所用的种子先在75%酒精中浸种3 min消毒处理，用滤纸吸干水分后放在通风处迅速阴干。将消毒过的种子于室温下在提前准备好的菌液中浸泡2 h，人工接菌，将接菌完成的种子用滤纸吸干水分，放在通风处迅速阴干，装袋备用。用配制好的包衣成分对种子进行拌种处理。拌种时用小型喷雾器对药剂进行喷施，并不断搅拌，直至种子表面均匀沾满药剂，每种包衣成分播50粒种子，设置3次重复，以人工接菌后清水拌种处理为对照组。
1.2.4 播种
育苗基质采用杨树锯末和蛭石并以5∶1的比例混合配比，将基质用100 ℃的水高温灭菌，然后将基质装入规格为5×10个穴的育苗盘中，每穴播两粒。播种前将基质浇透水，播种后育苗盘上盖塑料薄膜保持充分的温度，每天浇水保持基质的适宜湿度，在苗期喷施营养液，以供幼苗生长。
1.3 指标测定
在出苗后第5天，真叶长出前，统计出苗率。在第一片真叶平展后，测量第一真叶长、宽，叶绿素含量，茎粗，株高。出苗率（%）=出苗数/播种数×100。 出苗后第14天幼苗开始发病，发病初期（出苗后16 d）、发病末期（出苗后25 d）分别进行发病率及病情调查统计，共统计两次。病情鉴定参照万秀琴等人的方法。0级：植株无病斑;1级：叶片病斑较少，病斑面积占整棵植株面积的20%以下;3级：病斑较多，病斑面积占总面积的21%～40%;5级：病斑较多，病斑面积占总面积的41%～60%;7级：病斑很多或融合成大斑，病斑面积占总面积的61%～80%;9级：病斑很多，胚轴或茎部有病斑，病斑面积占总面积的 81%以上，植株死亡。病情指数=（∑发病级数×发病株数）/（最高病级×总株数）×100。防治效果（%）=（对照病情指数-处理病情指数）/对照病情指数×100[14-15]。
1.4 数据处理
试验均采用Microsoft Excel进行数据统计和制图，数据处理时采用IBF SPSS Statistics 23软件进行单因素方差分析。
2 结果与分析
2.1 不同包衣成分處理带BFB西瓜种子对出苗率的影响
不同包衣成分处理对西瓜带菌种子出苗率的影响如图1所示，所有处理组出苗率均大于85%，但BF+高浓度铜制剂对带菌西瓜种子出苗表现出一定抑制作用，T3、T6、T9处理组出苗率均低于T1、T4、T7。BF+高浓度硫酸铜对出苗的影响最大，T3处理组出苗率为86.67%，显著低于CK;BF+过氧乙酸对带菌种子的出苗影响最小，与对照无显著性差异;T10出苗率最高，为98.00%。
2.2 不同包衣成分处理带BFB西瓜种子对幼苗生长指标的影响
不同包衣成分处理带BFB西瓜种子对幼苗茎粗、第一真叶长×宽、株高的影响如表2所示。由表2可知，T1幼苗茎粗显著高于CK;T1～T3处理组，随着硫酸铜浓度的增高，幼苗茎粗逐渐减小;T8幼苗茎粗最小，其他处理组与CK之间没有显著性差异。T1、T2、T3、T5处理组第一真叶长×宽显著高于CK，最大值为T1处理组，高于CK 57.03%;其他处理组与CK之间没有显著性差异。T3、T5、T8处理组株高显著低于CK，T3处理组株高最低，其他处理组与CK无显著性差异，株高最高处理组为T2。各处理组对叶绿素含量影响较小，且各处理组之间无显著性差异，叶绿素含量最高为T4处理组。
2.3 不同包衣成分处理带BFB西瓜种子对幼苗期发病率的影响
不同包衣成分处理对西瓜幼苗细菌性果斑病发病率的影响如图2、图3所示，BF+4种杀菌剂处理带菌种子，均可降低BFB在幼苗期的发病率。在发病初期，CK发病率为19.72%，BF+硫酸铜处理带菌种子，BFB在幼苗期的发病率最低，T1～T3发病率为1.4%～2.31%，均显著低于CK;在发病末期，CK发病率为49.30%，BF+可杀得叁千处理带菌种子，幼苗期BFB的发病率最低，T7～T9发病率为12.68%～20.04%，显著低于CK。
2.4 不同包衣成分处理带BFB西瓜种子对幼苗期病情指数的影响不同包衣成分处理带菌种子后幼苗期BFB病情指数如图4、图5所示，在发病初期，CK病情指数为4.76，T1病情指数最低;处理组中，病情指数最高的为T7，其与T1呈显著性差异。在发病末期，CK病情指数为17.71，T4病情指数最低，T12病情指数最高，其与T4呈显著性差异。
2.5 不同包衣成分处理带BFB西瓜种子对幼苗期防治效果的影响
不同包衣成分处理对西瓜细菌性果斑病的防治效果如图6、图7所示，BF+4种杀菌剂处理带菌种子均可对BFB在幼苗期产生一定的防治效果。在发病初期，防治效果最好的为BF+硫酸铜处理，T1～T3防治效果为84.01%～96.03%;防治效果最差的为BF+可杀得叁千，T7～T9防治效果为74.16%～84.03%。防治效果最好的处理组是T1、T5，其防治效果显著高于其他处理组。在发病末期，BF+醋酸铜对BFB的防治效果最好，T4～T6防治效果为71.22%～87.18%;防治效果最差的为BF+过氧乙酸处理，T10～T12防治效果为52.18%～64.22%。发病末期防治效果最好的处理组为T5，其防效为87.18%。
3 讨论
国内外对细菌性病害的防治主要集中在铜制剂、农用抗生素类药剂等方面。
铜制剂具有杀菌广谱、药效持续时间长、可以防治多种真菌和细菌性病害等特点，是防治细菌性病害最常见的药物[16]。铜制剂在其他作物的细菌性病害防治中也有广泛应用，宋晓兵等研究发现，3%噻霉酮微乳剂和77%氢氧化铜水分散粒剂对柑橘溃疡病菌有较强的抑制效果和较好的田间防治效果[17]。郭永斌等研究发现，倍量式波尔多液对苹果树腐烂病菌分生孢子萌发的抑制率最高，药后20 d抑菌率仍达87.97%[18]。黄小威等研究发现，氢氧化铜等3种铜制剂对辣椒青枯病均有一定的防治效果[19]，本文与以上研究结果相似。
赵廷昌等研究发现，加瑞农处理带菌种子可以对BFB产生一定的防治效果[20]。王爽等通过室内药效测定发现，噻霉酮对BFB病原菌的抑菌效果最好，氧化铜和琥胶肥酸铜等铜制剂抑菌效果最差[21]，这与本试验结果不同。
本试验发现，在发病末期，BF+1 g/L醋酸铜对BFB的防治效果最好，可能是由于试验方法与环境不同所造成的差异。
4 结论
本试验研究发现，BF+4种杀菌剂均可对西瓜带菌种子在幼苗期BFB产生一定的防治效果。在发病初期，T1处理组幼苗期BFB的发病率、病情指数最低，防治效果最好，达到96.03%;在发病末期，T7的发病率最低，T1的病情指数最低，T5处理组的防效最高，防治效果为87.18%。 从试验中幼苗生长指标来看，T1处理下的幼苗茎粗、第一真叶长×宽显著高于对照，T2处理组幼苗株高最高，第一真叶叶绿素含量在各处理组之间没有显著性差异。
参考文献：
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关键词：包衣成分;西瓜;细菌性果斑病;幼苗;防治效果
细菌性果斑病（BFB）是一种严重为害葫芦科植物的世界性病害[1-2]。BFB在持续湿度大的情况下，菌脓从叶片流落在果实上，致使果实形成病斑，失去经济价值，给瓜农带来严重的经济损失，被瓜农称为西瓜、甜瓜的“癌症”[3]。BFB是一种典型的种传性病害，如果不加强种子检测和灭菌处理，病原菌会随着种子大面积传播，对整个西瓜、甜瓜种植行业产生巨大危害。
目前，针对BFB的种子处理方法主要有物理[4]、化学[5]、生物[6]等。化学方法主要是采用杀菌剂来消灭病原菌，包括铜制剂、抗生素等。前人研究发现，铜制剂杀菌剂是一种保护型杀菌剂，具有杀菌效率高、药效期长、病菌难以产生抗药性及经济环保等优点[7]。刘克贞等研究发现，过氧乙酸对BFB有一定防效。对于细菌性果斑病的防治是当下研究的热点，但大多采用单一药剂处理，针对BFB的复合药剂处理研究较少[8]。
前人[9-11]研究表明，一定浓度氮、锌、锰、钾肥可以促进植物幼苗的生长，柠檬酸可以减轻重金属盐的毒害[12]。本试验以BF配方肥（氮、锌、锰、钾）为基础，加入4种殺菌剂，分别为硫酸铜（CuSO4）、醋酸铜（（CH3COOH）2Cu）、可杀得叁千、过氧乙酸（CH3COOOH），配制成不同的西瓜种子包衣成分，从中筛选出能够对西瓜BFB产生防治效果的包衣成分，为西瓜BFB的防治提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试种子
供试西瓜品种为“西域四号”，由新疆西域种业有限公司提供，于2019年生产。供试西瓜细菌性果斑病病原菌由新疆农业大学林学与园艺学院植物生理学实验室提供。
1.1.2 供试药剂
供试药剂有BF配方肥（含氮、锌、锰、钾，由新疆农业大学林学与园艺学院园艺系提供）、KH2PO4（天津市光复科技发展有限公司生产，分析纯）、柠檬酸（天津市光复科技发展有限公司生产，分析纯）、（NH4）2SO4（天津市致远化学试剂有限公司生产，分析纯）、ZnSO4（天津市致远化学试剂有限公司生产，分析纯）、MnSO4（天津市北联精细化学品开发有限公司生产，分析纯）、CuSO4（天津市致远化学试剂有限公司生产，分析纯）、醋酸铜（天津市福晨化学试剂厂生产，分析纯）、46%可杀得叁千（美国杜邦公司生产）、CH3COOOH（天津市致远化学试剂有限公司生产，浓度≥15%）。
1.2 试验方法
1.2.1 试验设计
本试验以BF配方肥为基础，加入CuSO4、（CH3COOH）2Cu、可杀得叁千、CH3COOOH，配制成种子包衣成分。其中CuSO4、（CH3COOH）2Cu、可杀得叁千、CH3COOOH各设置3个浓度梯度，共计12个处理组，以清水处理为CK。BF配方肥药剂的浓度为4 g/L（NH4）2SO4 、0.75 g/L ZnSO4、0.5 g/L MnSO4、4.5 g/L KH2PO4、8 g/L柠檬酸。添加药剂浓度及包衣成分编号见表1。
1.2.2 细菌性果斑病病原菌活化及培养
病原菌活化用KMB固体培养基（20 g胰蛋白胨、1.5 g K2HPO4、1.5 g MgSO4·7H2O、10 g甘油、10 g琼脂粉，定容1 L，pH值7.2），病原菌活化后于28 ℃恒温培养箱培养24 h，挑取单菌落接种NB（5 g/L胰蛋白胨、3 g/L牛肉粉，pH值7.2）于液体培养基中，在220 r/min、28 ℃条件下培养16～18 h。用分光光度计测定菌悬液的OD值，并用灭菌水将菌悬液浓度调到OD600为0.2～0.5备用[13]。
1.2.3 种子处理
试验所用的种子先在75%酒精中浸种3 min消毒处理，用滤纸吸干水分后放在通风处迅速阴干。将消毒过的种子于室温下在提前准备好的菌液中浸泡2 h，人工接菌，将接菌完成的种子用滤纸吸干水分，放在通风处迅速阴干，装袋备用。用配制好的包衣成分对种子进行拌种处理。拌种时用小型喷雾器对药剂进行喷施，并不断搅拌，直至种子表面均匀沾满药剂，每种包衣成分播50粒种子，设置3次重复，以人工接菌后清水拌种处理为对照组。
1.2.4 播种
育苗基质采用杨树锯末和蛭石并以5∶1的比例混合配比，将基质用100 ℃的水高温灭菌，然后将基质装入规格为5×10个穴的育苗盘中，每穴播两粒。播种前将基质浇透水，播种后育苗盘上盖塑料薄膜保持充分的温度，每天浇水保持基质的适宜湿度，在苗期喷施营养液，以供幼苗生长。
1.3 指标测定
在出苗后第5天，真叶长出前，统计出苗率。在第一片真叶平展后，测量第一真叶长、宽，叶绿素含量，茎粗，株高。出苗率（%）=出苗数/播种数×100。 出苗后第14天幼苗开始发病，发病初期（出苗后16 d）、发病末期（出苗后25 d）分别进行发病率及病情调查统计，共统计两次。病情鉴定参照万秀琴等人的方法。0级：植株无病斑;1级：叶片病斑较少，病斑面积占整棵植株面积的20%以下;3级：病斑较多，病斑面积占总面积的21%～40%;5级：病斑较多，病斑面积占总面积的41%～60%;7级：病斑很多或融合成大斑，病斑面积占总面积的61%～80%;9级：病斑很多，胚轴或茎部有病斑，病斑面积占总面积的 81%以上，植株死亡。病情指数=（∑发病级数×发病株数）/（最高病级×总株数）×100。防治效果（%）=（对照病情指数-处理病情指数）/对照病情指数×100[14-15]。
1.4 数据处理
试验均采用Microsoft Excel进行数据统计和制图，数据处理时采用IBF SPSS Statistics 23软件进行单因素方差分析。
2 结果与分析
2.1 不同包衣成分處理带BFB西瓜种子对出苗率的影响
不同包衣成分处理对西瓜带菌种子出苗率的影响如图1所示，所有处理组出苗率均大于85%，但BF+高浓度铜制剂对带菌西瓜种子出苗表现出一定抑制作用，T3、T6、T9处理组出苗率均低于T1、T4、T7。BF+高浓度硫酸铜对出苗的影响最大，T3处理组出苗率为86.67%，显著低于CK;BF+过氧乙酸对带菌种子的出苗影响最小，与对照无显著性差异;T10出苗率最高，为98.00%。
2.2 不同包衣成分处理带BFB西瓜种子对幼苗生长指标的影响
不同包衣成分处理带BFB西瓜种子对幼苗茎粗、第一真叶长×宽、株高的影响如表2所示。由表2可知，T1幼苗茎粗显著高于CK;T1～T3处理组，随着硫酸铜浓度的增高，幼苗茎粗逐渐减小;T8幼苗茎粗最小，其他处理组与CK之间没有显著性差异。T1、T2、T3、T5处理组第一真叶长×宽显著高于CK，最大值为T1处理组，高于CK 57.03%;其他处理组与CK之间没有显著性差异。T3、T5、T8处理组株高显著低于CK，T3处理组株高最低，其他处理组与CK无显著性差异，株高最高处理组为T2。各处理组对叶绿素含量影响较小，且各处理组之间无显著性差异，叶绿素含量最高为T4处理组。
2.3 不同包衣成分处理带BFB西瓜种子对幼苗期发病率的影响
不同包衣成分处理对西瓜幼苗细菌性果斑病发病率的影响如图2、图3所示，BF+4种杀菌剂处理带菌种子，均可降低BFB在幼苗期的发病率。在发病初期，CK发病率为19.72%，BF+硫酸铜处理带菌种子，BFB在幼苗期的发病率最低，T1～T3发病率为1.4%～2.31%，均显著低于CK;在发病末期，CK发病率为49.30%，BF+可杀得叁千处理带菌种子，幼苗期BFB的发病率最低，T7～T9发病率为12.68%～20.04%，显著低于CK。
2.4 不同包衣成分处理带BFB西瓜种子对幼苗期病情指数的影响不同包衣成分处理带菌种子后幼苗期BFB病情指数如图4、图5所示，在发病初期，CK病情指数为4.76，T1病情指数最低;处理组中，病情指数最高的为T7，其与T1呈显著性差异。在发病末期，CK病情指数为17.71，T4病情指数最低，T12病情指数最高，其与T4呈显著性差异。
2.5 不同包衣成分处理带BFB西瓜种子对幼苗期防治效果的影响
不同包衣成分处理对西瓜细菌性果斑病的防治效果如图6、图7所示，BF+4种杀菌剂处理带菌种子均可对BFB在幼苗期产生一定的防治效果。在发病初期，防治效果最好的为BF+硫酸铜处理，T1～T3防治效果为84.01%～96.03%;防治效果最差的为BF+可杀得叁千，T7～T9防治效果为74.16%～84.03%。防治效果最好的处理组是T1、T5，其防治效果显著高于其他处理组。在发病末期，BF+醋酸铜对BFB的防治效果最好，T4～T6防治效果为71.22%～87.18%;防治效果最差的为BF+过氧乙酸处理，T10～T12防治效果为52.18%～64.22%。发病末期防治效果最好的处理组为T5，其防效为87.18%。
3 讨论
国内外对细菌性病害的防治主要集中在铜制剂、农用抗生素类药剂等方面。
铜制剂具有杀菌广谱、药效持续时间长、可以防治多种真菌和细菌性病害等特点，是防治细菌性病害最常见的药物[16]。铜制剂在其他作物的细菌性病害防治中也有广泛应用，宋晓兵等研究发现，3%噻霉酮微乳剂和77%氢氧化铜水分散粒剂对柑橘溃疡病菌有较强的抑制效果和较好的田间防治效果[17]。郭永斌等研究发现，倍量式波尔多液对苹果树腐烂病菌分生孢子萌发的抑制率最高，药后20 d抑菌率仍达87.97%[18]。黄小威等研究发现，氢氧化铜等3种铜制剂对辣椒青枯病均有一定的防治效果[19]，本文与以上研究结果相似。
赵廷昌等研究发现，加瑞农处理带菌种子可以对BFB产生一定的防治效果[20]。王爽等通过室内药效测定发现，噻霉酮对BFB病原菌的抑菌效果最好，氧化铜和琥胶肥酸铜等铜制剂抑菌效果最差[21]，这与本试验结果不同。
本试验发现，在发病末期，BF+1 g/L醋酸铜对BFB的防治效果最好，可能是由于试验方法与环境不同所造成的差异。
4 结论
本试验研究发现，BF+4种杀菌剂均可对西瓜带菌种子在幼苗期BFB产生一定的防治效果。在发病初期，T1处理组幼苗期BFB的发病率、病情指数最低，防治效果最好，达到96.03%;在发病末期，T7的发病率最低，T1的病情指数最低，T5处理组的防效最高，防治效果为87.18%。 从试验中幼苗生长指标来看，T1处理下的幼苗茎粗、第一真叶长×宽显著高于对照，T2处理组幼苗株高最高，第一真叶叶绿素含量在各处理组之间没有显著性差异。
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