同时表达蓝舌病毒四个主要结构蛋白可装配成病毒样颗粒

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为研制蓝舌病毒 (bluetonguevirus ,BTV)基因工程疫苗和进一步研究BTV结构与功能的关系 ,对BTV病毒样颗粒 (VLP)的装配进行了研究。同时在昆虫细胞中表达BTV主要结构蛋白VP7、VP3、VP2与VP5 ,将细胞裂解液超速离心纯化后 ,发现主要存在两种形态的颗粒 :一种与前文报道的病毒核心样颗粒 (CLP)相同 ,直径约为 6 0nm~ 70nm ,蛋白壳厚 10nm~ 15nm ;另一种大小为 70nm~ 80nm ,蛋白壳厚 2 0nm~ 30nm ,与完整空心BTV颗粒形态一致。这些颗粒是由VP2 /3、VP5与VP7组成的 ,不含核酸和其它任何BTV蛋白 ,并且具有诱导中和抗体的活性和血凝活性 ,与预期结果一致。以BTV13VP7与VP3蛋白为内壳 ,以与其基因相比变异较大的BTV10VP2、VP5为外壳 ,成功地实现了VLP装配 ,提示BTV颗粒内壳与外壳蛋白间相互作用引发装配的区域可能是保守的 ,VP2蛋白的高变性对其与内壳间的相互作用并无影响
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